许望纯 朱贾娴 李祖国

    作者单位：510515 火箭军广州疗养院二科(许望纯)；510515 南方医科大学病理学系(朱贾娴，李祖国)

    鼻咽癌是常见的恶性肿瘤之一，好发于我国南方各省，其发病率为男性26.1/10万，女性10.1/10万，严重危害人民身体健康[1]。目前对鼻咽癌的治疗方法主要是放疗或以放疗为主的综合性治疗[2]，效果虽然满意，但仍存在严重的放疗反应及毒副作用，并且需支付昂贵的医疗费用，从而使部分患者难以接受治疗。因此，开发研制高效、低毒、廉价，能同时预防和治疗鼻咽癌的中药制剂，一方面能促进鼻咽癌高发地区人民的身体健康，同时对发展传统制药产业有着重要推动作用，具有极大的社会和经济意义。

    蒲葵子为棕榈科植物蒲葵的种子，性平，淡，味甘涩，治外伤出血，选方治疗各种癌症[3]。广东省江门、新会、四会部分居民采用民间流传秘方自行采集蒲葵子治疗中晚期鼻咽癌，取得良好的治疗效果。广西医科大学附属肿瘤医院研制的金浦抑瘤片由金不换、蒲葵子、高硒螺旋藻、绞股蓝等组成，经临床应用证明具有良好的抗鼻咽癌作用[4]。我们曾对经病理诊断确诊为鼻咽癌低分化鳞状细胞癌的20例患者采用放射治疗加蒲葵子为主的中药治疗，随访3年，无一例复发。另外2例老年鼻咽癌晚期患者，未行放射治疗而仅服用蒲葵子，随访3年，癌肿有消退。从临床实践中观察到，蒲葵子中含有有效的抗鼻咽癌药用成分，且患者服用蒲葵子未见明显毒副作用。本研究将利用蒲葵子的甲醇提取物，以鼻咽癌细胞株C666和5-8F为对象进行系统的体外抗鼻咽癌活性实验，旨在确认其抗鼻咽癌的作用效果，初步探讨其抗癌的机制，并为受试提取物研制成为抗鼻咽癌的中药有效制剂提供实验依据。

    1 材料

    1.1 细胞株 人鼻咽癌C666和5-8F细胞均购自美国ATCC公司，由本实验室保存。用含有8%的胎牛血清的RPMI1640培养基置于37℃ 5%CO2饱和湿度条件下培养备用。

    1.2 药物与试剂 蒲葵子采自南方医科大学校园及解放军广州疗养院院区绿化植物蒲葵，将蒲葵子自然晾干后粉碎，经甲醇萃取为蒲葵子甲醇提取物。RPMI1640培养基购于美国Gibco公司，胎牛血清购于美国Corning公司。CCK8试剂盒购于上海翊圣生物科技有限公司。荧光二抗及DAPI购于北京中杉金桥生物技术有限公司。Caspase3和P21抗体及二抗购于美国proteintech公司。Caspase7抗体购于美国ABclonal公司。Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购于江苏凯基生物技术股份有限公司 ......