研究表明，芳香化酶抑制剂能够减少生长期体内雄激素向雌激素的转化，抑制生长板软骨细胞凋亡，从而起到延缓骨骺闭合，促进身高增长的目的

    。而7-羟基黄烷酮作为一种天然产物黄酮类化合物，具有较好的芳香化酶抑制作用

    。前期的实验发现其具有抑制生长板软骨细胞凋亡的效果，但是最佳药物浓度尚无定论

    。因此本研究对其抑制生长板软骨细胞凋亡的最佳药物浓度进行筛选，并对其延迟骨骺闭合促进长骨生长进行验证，为该药物的临床使用及后续实验提供一定研究基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂与仪器1.1.1 主要试剂 0.25%胰蛋白酶，胎牛血清，IL-1β，来曲唑，7-羟基黄烷酮，MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒MTT，胶原蛋白酶Ⅱ，台盼蓝染色液，曲拉通，4'，6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐DAPI溶液，二甲基亚砜DMSO，封闭山羊血清，流式细胞术ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒，Ⅱ型胶原抗体Collagen Type ⅡAntibody，荧光封片剂Fluoromount-G。

    本文将该滑坡的物理介质概化成滑体土与滑床基岩两种介质，基于FLAC3D数值分析平台和该滑坡的几何形态特征，构建的数值模型如图10所示。其中，滑体表面的102、100号点分别对应着JCD-1、JCD-2地表GPS监测点。

    1.1.2 主要仪器 细胞培养孔板，电子天平，恒温水浴锅，37 ℃恒温细胞培养箱，电热恒温震荡水槽，立式压力蒸汽灭菌器，高速离心机，高级分析倒置显微镜，流式细胞仪，多功能酶标仪，血球计数板。

    1.2 实验方法

    1.2.3 流式细胞仪验证7-羟基黄烷酮对IL-1β引起细胞凋亡的抑制作用 取培养的对数期生长板软骨细胞，以正常培养的细胞为正常对照组；以20 ng/mL IL-1β诱导每孔细胞凋亡为模型对照组；以加入来曲唑为阳性对照组；以加入40 μM 7-羟基黄烷酮为7-羟基黄烷酮组，各组培养24 h。悬浮弃上清。然后用1mL Binding Buffer重悬细胞。每管加入100 μL细胞(1×10

    个)。再向管中加入5 μL Annexin V-FITC。室温避光，混匀10 min。加入5 μL PI，室温避光，孵育5 min。加入PBS至500 μL，混匀。1 h内用流式细胞仪检测。观察各组细胞凋亡情况，并统计细胞凋亡率。

    1.2.1 羊水染色体核型分析 在无菌操作条件下抽取羊水约10ml，并进行接种、培养、收获、制片、G显带及核型分析。

    2.2 7-羟基黄烷酮抑制生长板软骨细胞凋亡的初步药物浓度筛选 溶剂组及非造模+用药组软骨细胞活率与正常组差异均无统计学意义 ......