Annexin A2在类风湿性关节炎滑膜组织中的表达

    陈扬*

    ( 浙江中医药大学第一临床医学院 杭州 311422)

    摘 要目的：检测膜联蛋白(annexin)A2在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)滑膜组织中的表达，研究annexin A2与RA发生的相关性，期望能够在基因水平早期诊断和治疗RA，为明确RA的靶向性治疗提供帮助。 方法：采用real-time PCR技术检测annexin A2 mRNA在17例RA和15例骨性关节炎(osteoarthritis，OA)滑膜组织标本中的表达；采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining，HE染色)对此32例滑膜组织标本进行了病理学观察，从炎性细胞浸润、纤维增生、滑膜细胞增生以及新生血管形成等4个方面加以评估。并比较两组的annexin A2 mRNA的相对表达量以及病理学观察评估结果。结果：annexin A2 mRNA在所有RA及OA滑膜组织样本中均有表达，但其在RA滑膜组织中的表达量显著高于OA滑膜组织(P1 资料与方法

    1.1 临床资料

    收集浙江中医药大学附属第一医院骨伤科2013年3月-2014年6月膝关节置换术切除的类风湿性关节炎(RA)滑膜组织标本17例，骨性关节炎(osteoarthritis, OA)滑膜组织标本15例。每一个标本的收集都取得了患者知情同意。所有RA患者均符合美国风湿病学会(ACR)1987年修订的诊断标准[6]：①早起关节僵硬至少l h(≥6周)；②3个以上关节肿胀(≥6周)；③手关节或掌指关节或近端指间关节肿胀(≥6周)；④对称性肿胀；⑤手的X线改变。⑥皮下结节；⑦类风湿因子阳性。如具备4项以上指标即可确诊。所有OA患者均根据1995年美国风湿病协会修订的诊断标准[7]，即：①一个月来大多数时间发生膝痛；②X线片示关节边缘骨赘；③关节液检查符合骨关节炎(清晰、黏稠、WBC<2×109/L)；④年龄≥40岁；⑤晨僵≤30 min；⑥关节活动时有关节摩擦音，诊断标准：①②确诊或①③⑤⑥确诊或①④⑤⑥确诊。所有标本离体后迅速放置于-80℃超低温冰箱保存。

    1.2 实验主要仪器与试剂

    主要仪器：iQ5 PCR仪(美国Bio-Rad公司)、台式高速离心机(德国Heraeus公司)、超低温冰箱(日本SANYO公司)、台式恒温振荡器(江苏太仓实验仪器厂)、恒温水浴箱(上海医疗器械七厂)、超净工作台(苏州三兴净化公司)、紫外分光光度仪(美国Thermo公司)、切片机(德国Microm公司)等均由浙江中医药大学动物实验室提供 ......