MRSA医院感染危险因素及分子流行病学调查(2)

http://www.100md.com 2015年8月1日 上海医药2015年第15期

     DNA Engine PCR仪购自Bio-Rad公司，凝胶电泳仪和成像系统购自Tanon公司。K-B法药敏纸片购自杭州天和微生物有限公司，RAPD-PCR引物(5’-GAGAGGCCTCGCAGGCATGACCT-3’)、rTaq酶和DL2000 DNA Marker购自Takara公司。

    1.2 方法

    1.2.1 易感因素分析

    根据预试验分析，调查研究组和对照组患者以下7种感染相关因素：①老龄(>65岁)；②住院时间延长(>12 d)；③基础疾病；④2种以上抗菌药物使用；⑤7 d以上抗菌药物使用；⑥免疫抑制剂使用；⑦2项以上侵入性手术操作。统计两组之间计数资料有无显著性差异，并计算比数比(odds ratio， OR)。统计软件为SPSS 13.0，方法采用多因素二分类Logistic回归，选入方程内变量的方法为“Enter”。

    1.2.2 耐药表型检测

    参照CLSI 2012年标准，采用K-B法对从50例患者中分离到的50株HA-MRSA菌株的耐药表型进行检测，抗菌药物包括庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)、复方新诺明(SXT)、红霉素(ERY)和克林霉素(CLI)。

    1.2.3 RAPD分型

    通过煮沸法[2]制备DNA模板 ......