1.4.1.2 供试液的制备

    取供试品20 g(验证批号为替硝唑栓：151002、151003、151004)至含无菌十四烷酸异丙酯40 ml中[3]，振摇，使供试品完全溶解，然后加入45 ℃ pH 7.0无菌氯化钠蛋白胨溶液200 ml，混匀，萃取，静置，使明显分层，用分液漏斗取水相，分装9.9 ml若干份作为1∶10的供试液备用[4-5]。

    试验组取备用供试液1 ml，加入无菌pH 7.0氯化钠蛋白胨溶液500 ml混匀，注入开放式滤器无菌过滤(Millipore混合纤维素酯滤膜，孔径0.45 mm)[6]。用无菌pH 7.0氯化钠蛋白胨溶液冲洗滤膜，每次用量100 ml，总量为500 ml[7]。在最后100 ml冲洗液中加入上述试验微生物(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白假丝酵母、黑曲霉)菌液0.1 ml，平行制备2份。将含细菌和真菌的滤膜分别反贴于0.2%卵磷脂和2%聚山梨酯80胰酪胨大豆琼脂(TSA)和沙氏葡萄糖琼脂平皿上，于规定温度培养并观察结果[8]，分别作为计数法验证中需氧细菌和真菌总数计数法适用性试验 ......