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编号:13307670
柱前衍生高效液相色谱法测定血管紧张素的氨基酸组成(3)
http://www.100md.com 2018年4月15日 《上海医药》 2018年第11期
    

    3 讨论

    氨基酸组成分析中干扰性因素较多,在试验之前应充分清洗钝化液相色谱,尽量减少液相系统对测定的干扰。取下色谱柱,将各管路中的有机相用高纯水进行过渡冲洗,用30%磷酸清洗1 h左右,再换高纯水冲洗至出水管路口pH为6~7。将清洗好的管路进行钝化,用6 mol/L硝酸溶液冲洗1 h左右,再换高纯水冲洗至出水管路口pH为6~7,完成钝化。除色谱仪器的准备之外,试验中所用玻璃器具如样品水解管、衍生管等,应在试验前用1 mol/L盐酸溶液煮1 h或在浓硝酸中浸泡后,用高纯水冲洗数次,烘干放置于密闭器具中备用。试验过程应尽量无尘,并戴无尘手套和口罩,防止杂蛋白的影响。

    氨基酸分析中常见的柱前衍生试剂主要有OPA(邻苯二甲醛)、FMOC-Cl(氯甲酸芴甲酯)、FITC(异硫氰酸荧光素)、AQC(6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺碳酸盐),其中OPA不能与仲氨酸反应;FMOC-Cl衍生产物干扰测定 ......
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