阿奇霉素片微生物限度检查方法的适用性验证(1)
摘 要 目的：建立大环内酯类抗生素药物阿奇霉素片微生物限度检查方法并对其进行验证。方法：参照2015年版《中国药典》四部通则，采用薄膜过滤法测定阿奇霉素片对金黄色葡萄球菌等5种试验菌种的回收率，并对其进行了控制菌适用性试验。结果：5种试验菌回收率均在0.5～2.0范围，控制菌可检出。结论：本试验所建立方法可用于阿奇霉素片的微生物限度檢查。
关键词 阿奇霉素 验证 微生物限度试验
中图分类号：R927.11 文献标志码：A 文章编号：1006-1533(2019)23-0107-04
Applicability validation for the microbial limit test of azithromycin tablets
QU Yanping*
(Shanghai Shyndec Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 200137， China)
ABSTRACT Objective： To establish a method for the microbial limit test of azithromycin tablets and to verify it. Methods： According to the fourth part of the 2015 edition of Chinese Pharmacopoeia principles， the recovery rates of azithromycin tablets to 5 kinds of test microorganisms including Staphylococcus aureus， Pseudomonas aeruginosa， Bacillus subtilis， Candida albicans and Aspergillus niger were determined by membrane filtration and Petri dish cultivation， and the applicability test of Escherichia coli as the control bacterium was also performed. Results： The recoveries of the five tested bacteria ranged from 0.5 to 2.0， and the control bacteria could be detected. Conclusion： The established method can be used for microbial limit test of azithromycin tablets.
KEy WORDS azithromycin； verification； microbial limit test
阿奇霉素(azithromycin)是第一个十五元环大环内酯类抗生素(macrolide)，也是第一个氮杂内酯类抗生素(azalide)[1]。其对革兰阳性菌及厌氧菌有较好的抗菌作用外，对革兰阴性菌中的流感嗜血杆菌、淋病奈瑟球菌有很强的抗菌作用[2]。大环内酯类抗生素为快效抑菌剂，广泛应用于临床，近些年来，大环内酯类抗生素的发展较快，尤其是其长效品种的出现，更给该类药物的临床应用带来了活力[3]。上海现代制药股份有限公司自2007年2月生产销售阿奇霉素片至今，在销售市场占有一定份额，由于《中国药典》2015年版摒弃了离心处理获得供试液，需通过其他处理获得供试液，供试液中抑菌作用的分散浓度也将直接影响验证的回收率，故需对该产品重新进行微生物限度检查方法的适用性验证，同时对其他大环内酯类抗生素无微生物限度检查法的建立具有一定的借鉴意义[4]。阿奇霉素片微生物限度检查包括需氧菌、霉菌和酵母，控制菌选取大肠埃希菌。对具有抗菌活性的药品进行微生物限度检查时，应首先消除其抗菌活性，并通过实验验证抗菌活性的去除是否彻底，以保证检验结果的有效性，薄膜过滤法是去除药品中抗菌成分的最有效方法[5]。同时加入适宜的中和剂也能起到有效降低抑菌性的作用。为保障患者的用药安全，确立可靠的微生物限度检验方法，本试验参照2015年版《中国药典》四部通则1105、1106非无菌产品微生物限度检查微生物计数法、控制菌检查法，对阿奇霉素片微生物限度检查方法进行了摸索与验证[6]，由于阿奇霉素在同类的大环内酯类抗生素中其抑菌性的强度偏中上，故在验证中发现需通过提高供试品溶液的稀释倍数，在样品溶解时加入适宜的中和剂(卵磷脂与吐温-80)[6]，并在薄膜过滤冲洗液中加入吐温-80作为增溶剂等方法相结合，可有效去除大环内酯类抗生素的抑菌作用。
1 材料和方法
1.1 药品与试剂
阿奇霉素片(上海现代制药股份有限公司，规格0.25 g，批号180304)。
pH 7.0氯化钠蛋白胨缓冲液(上海盛思生化科技有限公司，批号170801)；蛋黄卵磷脂(博飞美科试剂公司，批号18032)；吐温-80(国药集团化学试剂有限公司，批号20131016)。
1.2 培养基与菌种
胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)、胰酪大豆胨液体培养基(TSB)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)、麦康凯琼脂培养基、麦康凯液体培养基(上海盛思生化科技有限公司，批号分别为170801、171109、180103、161201、160701)。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus， CMCC(B) 26003)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，CMCC(B)10104)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis，CMCC(B)-63501)、白色假丝酵母(Candida albicans，CMCC(F)-98001)、黑曲霉(Aspergillus niger，CMCC(F)-98003)和大肠埃希菌(Escherichia coli，CMCC(B)44102)均来自于中国食品药品检定研究院。, 百拇医药(瞿燕萍)
关键词 阿奇霉素 验证 微生物限度试验
中图分类号：R927.11 文献标志码：A 文章编号：1006-1533(2019)23-0107-04
Applicability validation for the microbial limit test of azithromycin tablets
QU Yanping*
(Shanghai Shyndec Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 200137， China)
ABSTRACT Objective： To establish a method for the microbial limit test of azithromycin tablets and to verify it. Methods： According to the fourth part of the 2015 edition of Chinese Pharmacopoeia principles， the recovery rates of azithromycin tablets to 5 kinds of test microorganisms including Staphylococcus aureus， Pseudomonas aeruginosa， Bacillus subtilis， Candida albicans and Aspergillus niger were determined by membrane filtration and Petri dish cultivation， and the applicability test of Escherichia coli as the control bacterium was also performed. Results： The recoveries of the five tested bacteria ranged from 0.5 to 2.0， and the control bacteria could be detected. Conclusion： The established method can be used for microbial limit test of azithromycin tablets.
KEy WORDS azithromycin； verification； microbial limit test
阿奇霉素(azithromycin)是第一个十五元环大环内酯类抗生素(macrolide)，也是第一个氮杂内酯类抗生素(azalide)[1]。其对革兰阳性菌及厌氧菌有较好的抗菌作用外，对革兰阴性菌中的流感嗜血杆菌、淋病奈瑟球菌有很强的抗菌作用[2]。大环内酯类抗生素为快效抑菌剂，广泛应用于临床，近些年来，大环内酯类抗生素的发展较快，尤其是其长效品种的出现，更给该类药物的临床应用带来了活力[3]。上海现代制药股份有限公司自2007年2月生产销售阿奇霉素片至今，在销售市场占有一定份额，由于《中国药典》2015年版摒弃了离心处理获得供试液，需通过其他处理获得供试液，供试液中抑菌作用的分散浓度也将直接影响验证的回收率，故需对该产品重新进行微生物限度检查方法的适用性验证，同时对其他大环内酯类抗生素无微生物限度检查法的建立具有一定的借鉴意义[4]。阿奇霉素片微生物限度检查包括需氧菌、霉菌和酵母，控制菌选取大肠埃希菌。对具有抗菌活性的药品进行微生物限度检查时，应首先消除其抗菌活性，并通过实验验证抗菌活性的去除是否彻底，以保证检验结果的有效性，薄膜过滤法是去除药品中抗菌成分的最有效方法[5]。同时加入适宜的中和剂也能起到有效降低抑菌性的作用。为保障患者的用药安全，确立可靠的微生物限度检验方法，本试验参照2015年版《中国药典》四部通则1105、1106非无菌产品微生物限度检查微生物计数法、控制菌检查法，对阿奇霉素片微生物限度检查方法进行了摸索与验证[6]，由于阿奇霉素在同类的大环内酯类抗生素中其抑菌性的强度偏中上，故在验证中发现需通过提高供试品溶液的稀释倍数，在样品溶解时加入适宜的中和剂(卵磷脂与吐温-80)[6]，并在薄膜过滤冲洗液中加入吐温-80作为增溶剂等方法相结合，可有效去除大环内酯类抗生素的抑菌作用。
1 材料和方法
1.1 药品与试剂
阿奇霉素片(上海现代制药股份有限公司，规格0.25 g，批号180304)。
pH 7.0氯化钠蛋白胨缓冲液(上海盛思生化科技有限公司，批号170801)；蛋黄卵磷脂(博飞美科试剂公司，批号18032)；吐温-80(国药集团化学试剂有限公司，批号20131016)。
1.2 培养基与菌种
胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)、胰酪大豆胨液体培养基(TSB)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)、麦康凯琼脂培养基、麦康凯液体培养基(上海盛思生化科技有限公司，批号分别为170801、171109、180103、161201、160701)。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus， CMCC(B) 26003)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，CMCC(B)10104)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis，CMCC(B)-63501)、白色假丝酵母(Candida albicans，CMCC(F)-98001)、黑曲霉(Aspergillus niger，CMCC(F)-98003)和大肠埃希菌(Escherichia coli，CMCC(B)44102)均来自于中国食品药品检定研究院。, 百拇医药(瞿燕萍)