大鼠主动脉前庭自发慢电位的电生理基础研究
大鼠主动脉前庭部位存在自律细胞,其电位特征与窦房结优势起搏细胞和潜在起搏细胞电位相似。为了进一步阐明该部位自律细胞慢反应电位0相和4相去极化的离子基础,本实验应用常规的玻璃微电极细胞内记录技术,用离子通道阻断剂,初步分析了主动脉前庭部位慢反应自律细胞0相和4相的去极离子流。
1 资料与方法
1.1一般资料 成年大鼠10只,由漯河医专科实验动物中心提供。
1.2 动物手术及电刺激方法 击脑致昏后迅速开胸取出心脏,置于O2饱和的Locke液中。制好的标本用不锈钢针固定于灌流槽内的硅橡胶上,用改良的Locke液以10 ml/min进行恒速灌流,温度维持在36℃左右,灌流液中充以纯O2, pH 7.4。标本在灌流液中稳定30 min后开始实验。刺激时间由数秒至数分钟不等,直至诱发出稳定的自发节律,再停止电刺激。自发节律稳定后开始实验。动作电位经DWF-3型微电极放大器放大后,一路输入SBR-1型示波器进行观察,一路输入监听器监听,另一路经高速模数转换器输入微机,自动显示电信号,并分析动作电位的各项参数指标[1]。
1.3 观测指标 最大舒张电位(MDP)、动作电位幅值(APA)、0相最大除极速度(Vmax)、4相自动除极速度( VDD)、复极至50%和90%时间(APD50 and APD90)和自发放电频率(RPF)。
1.4 实验过程和分组 待自发节律稳定10 min后开始采集一组正常的慢反应动作电位作对照,然后改用其它灌流液灌流,记录每次灌流后的动作电位变化。实验分为: ①015Lmol/L尼索地平(Nis)组(n=6); ②112 mmol/L河豚毒(TTX)组(n=6);③2 mmol/L 4-氨基吡啶(4-AP)组(n=8); ④115mmol/L的CsCl组(n=8); ⑤低氧无糖组(n=6);⑥用Glibenclamide (Gli)预处理10 min后再用无糖液(含Gli)灌流组(n=6) ......
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