X射线照射后Rac1蛋白对慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响
 |
| 第1页 |
参见附件。
摘要：目的 探究电离辐射后Rac1蛋白对K562细胞凋亡的影响。方法 不同剂量X射线照射K562细胞，藻红B染色检测不同时间点细胞凋亡率，Western blot分析不同时间点Rac1蛋白的表达。结果 随着照射剂量的增加和时间的延长，细胞凋亡率有上升的趋势；电离辐射后总的Rac1蛋白表达未发生明显变化，随着时间延长Rac1蛋白表达量逐渐减少。结论 Racl蛋白表达的减少能够促进K562细胞的凋亡，其可能成为肿瘤基因治疗新的靶点。
关键词：X射线； Rac1；凋亡
Racl全称为Ras相关的C3肉毒素底物1，基因全长29Kb，定位于人染色体7p22，其转录产物有1.2kb和2.5kb两种，均在组织特异性高的组织中表达[1，2]，Rac1蛋白主要通过影响细胞形态，细胞的迁移，细胞周期进，基因转录调节，细胞的增殖、凋亡，血管形成等多方面来对肿瘤起作用。本次实验主要研究Rac1蛋白对辐射诱导K562细胞凋亡的影响机制。
1资料与方法
1.1一般资料 K562细胞株购自上海中科院细胞研究所，RPMI-1640培养基为四季青公司产品，新生牛血清为Gibco产品，藻红B染色购于上海四季青公司，兔抗Rac1(c-14)多克隆抗体、羊抗兔IgG二抗、兔源性抗人Actin抗体均购自美国Santa Cruz公司，直线加速器购于西门子公司(剂量率200cGy/min)。
1.2细胞凋亡分析 K562细胞用含有10%新生牛血清的RPMI1640培养基于37℃、5%CO2培养箱中培养至对数生长期，X射线分0、2、4、8 Gy四个剂量点照射对数生长期K562细胞，于照后24h和72h收集细胞，用染料藻红B﹙Erythrosine B﹚对细胞染色，活细胞不能被染色，死细胞的核被染成红色，根据被染色细胞占总观察细胞的百分率计算细胞的凋亡率，每次处理观察200个细胞 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。