AKT在Ghrelin抑制结肠癌细胞凋亡中的作用(2)
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1.6数据的统计处理实验所得计量数据均以均数±标准差(x±s) 的形式表示，采用SPSS 11.0统计软件进行检验分析，以P<0.05时为差异有统计学意义。
2结果
2.1 Ghrelin对体外结肠癌RKO细胞增殖的影响RKO细胞经5-FU(40 nmol·L-1)或5-FU(40 nmol·L-1)联合Ghrelin(10 nmol·L-1)作用24 h后，细胞存活率分别为34.65%和86.42%，两者相比较有统计学差异(P<0.05)；而wortmannin预处理1 h，细胞再经5-FU(40 nmol·L-1)+Ghrelin(10 nmol·L-1)作用24 h后细胞存活率为47.28%,与5-FU联合Ghrelin组相比较，有显著性差异(P<0.05)。
2.2 Ghrelin对结肠癌RKO细胞凋亡的影响细胞经DAPI染色后，荧光显微镜下观察到正常RKO细胞核完整，形态规则(图1A)，5-FU处理后多数细胞核出现明显固缩和染色体凝集等凋亡特征性改变(图1B)，表明5-FU可显著诱导RKO细胞凋亡；5-FU联合Ghrelin作用RKO细胞后少量细胞出现凋亡(图1C)；RKO细胞经wortmannin预处理再经5-FU+Ghrelin作用后凋亡细胞明显增多，并出现大量凋亡小体(图1D)。为排除wortmannin对RKO细胞增殖和凋亡的影响，预实验表明，wortmannin(200 nmol·L-1)单独作用1 h对RKO细胞无明显增殖抑制和凋亡诱导作用。
图1AKT抑制剂wortmannin对Ghrelin抗凋亡作用的影响
细胞经DAPI染色，荧光显微镜下观察到细胞形态学改变，箭头示典型凋亡细胞(×400)。
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