脱细胞同种异体神经移植物组织相容性初探(2)
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1.3组织学观察ARSN与NRSN用10%福尔马林固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜观察。取两例ARSN用4%多聚甲醛和0.5%戊二醛混合固定液固定，锇酸后固定，制成扫描电镜样本，电镜观察。
1.4免疫组织化学法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)检测LN和FNⅠ抗为兔抗鼠Fibronectin和Laminin抗体。PBS冲洗ARSN和NRSN，滴加3%的H2O2-甲醇15min。PBS 冲洗，滴加第一抗体，4℃过夜。第2d用PBS冲洗，加入第二抗体(生物素化羊抗鼠IgG)，室温下1h。PBS冲洗2次，室温下加链霉素抗生素蛋白-过氧化物酶溶液1h。DAB染色，苏木素复染，脱水、透明、封片，光镜观察。
1.5 ARSN的肌肉埋植分别取ARSN和NRSN埋植于大鼠股四头肌内。术后分别于第4、7d取出埋植物，周围带少量肌肉组织。10%的福尔马林固定，常规石蜡包埋，横切片，HE染色，光镜观察。
2结果
2.1 ARSN与NRSN的组织结构差异HE染色光镜观察ARSN，可见横切面呈网状，髓鞘、轴突均已经消失，仅见雪旺细胞基底膜，未见雪旺细胞核，神经外膜、束膜内未见细胞结构(图1、2)；纵切面可见基底膜呈典型的长空管状，雪旺细胞核、轴突和髓鞘均已消失，神经外膜、束膜中也未见细胞结构(图3、4)。扫描电镜观察，ARSN的轴突和髓鞘已经消失，仅可见空虚的基底膜管，与NRSN有明显的差异(图5，6)。
2.2免疫组织化学法检测LN和FN采用免疫组织化学法检测ARSN内的FN和LN，光镜观察可见基底膜管壁呈棕黄色、黄色的FN和LN阳性反应，说明脱细胞处理后，FN和LN的成分仍保留于基底膜管上，但与NRSN比较，阳性较弱，说明有少部分细胞外基质成分在脱细胞的过程中也被脱掉(图8-10) ......
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