α-烯醇化酶重组质粒的构建及其表达形式的研究(1)
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摘要：目的 构建α-烯醇化酶(alpha enolase，ENO1)重组表达质粒，并研究其表达形式。方法 以人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC)总RNA为模板合成cDNA；根据ENO1基因序列，设计上下游引物，以cDNA为模板，经多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)扩增得到目的基因片段ENO1；用T4DNA连接酶连接酶切产物和原核表达载体pET28(a)，获得重组表达质粒pET28(a)-ENO1；将pET28(a)-ENO1在BL21(DE3) E.Coli.大肠杆菌中诱导表达，分别取菌液上清和沉淀进行SDS-PAGE电泳，确定重组质粒的表达形式。结果 重组表达质粒pET28(a)-ENO1中的ENO1测序结果与GeneBank上的序列一致；pET28(a)-ENO1以可溶性表达为主。结论 ENO1重组质粒的成功构建及其可溶性为主的表达形式的确定，为研究ENO1的生物学活性及功能奠定了基础。
关键词：图书馆
Construction and Expression of α-enol Form of the Enzyme in Clinical Study of Recombinant Plasmi
NING Xing-wang1,XIE Xiao-bing1,ZHU Hui-bin1,WANG Shu-xiang1,GE Jin-wen2
(1.Medical Examination Center,The First Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine,Changsha 410007,Hunan,China;2 ......
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