豚鼠自身免疫性梅尼埃病相关抗原相对分子质量58000蛋白的二维电泳和质谱分析(2)
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参见附件。
图1 豚鼠内耳组织抗原双向凝胶电泳图谱
1～20分别为相对分子质量为58kD的20个蛋白质点。
2.2质谱结果及生物信息学分析 将这20个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析，以基质峰和酶自动降解峰进行校正，获得各蛋白点的肽片断质量指纹图谱。用Mascot搜索引擎在SwissProt数据库进行查询，结合双向电泳图谱上相应点的表观等电点、分子量综合分析，前17个蛋白质点被成功鉴定，部分蛋白质点得到同一种蛋白，总共获得11个蛋白(图2)。第一个蛋白点得到两个蛋白，其余各点都为一个蛋白；1、7、9、10、15和17六个点都得到凝血因子C，从相对分子质量、Mascot评分和蛋白功能等方面综合评估，凝血因子C可能为58kD蛋白中引起豚鼠自身免疫性梅尼埃病的主要蛋白。
图2 质谱分析后在SwissProt数据库搜索到的蛋白质
蛋白质点1～17经分析得到结果，第一个蛋白点为混合点，分别得到两个蛋白，其余各点为一个蛋白。
3讨论
内耳自身免疫性病理损伤在感音神经性聋(sensorineural hearing loss，SNHL)、梅尼埃病(Meniere's disease，MD)等内耳疾病的发生及其病理机制中可能起着重要作用[5，6]。实验研究证实多种内耳抗原在AIED的发病中起重要作用，对这些内耳抗原的研究将有助于找到敏感而特异的血清学检测方法，作为临床诊断的重要依据。
之前的研究初步筛选出分子量为68KD、58KD、42KD、28KD的蛋白质可能是致内耳自身免疫病理损伤的主要抗原成分[1] ......
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