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编号:13665885
杀菌/渗透增强蛋白基因转染小鼠受到大肠杆菌攻击后结肠粘膜上皮离子转运的变化机制(2)
http://www.100md.com 2014年8月20日 李利生 孔庆利 徐敬东 张悦 安云庆 朱进霞
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    参见附件。

     为了阐明转基因小鼠基础短路电流增加的机制,在结肠粘膜的顶膜侧加入上皮钠离子通道(ENaC)的阻断剂阿米洛利(10 μM),结果表明基础电流由81.3 ± 2 ?滋A/cm2 降到55.4 ± 2?滋A/cm2 (n = 9, P<0.01);而两个对照组则没有明显变化。结果提示ENaC参与了转基因小鼠基础电流的形成。

    2.2 Forskolin对结肠粘膜的作用 为了比较转基因鼠与对照组对促分泌物的影响有何差异,应用forskolin (10 μM)观察对结肠粘膜的作用。结果表明forskolin使转基因组的短路电流水平由81.3 ± 2?滋A/cm2 增加到 175.4 ± 5?滋A/cm2 (n = 7, P<0.01),显著高于对照组。应用Cl-通道阻断剂DPC可以明显抑制 forskolin引起的短路电流,从175.4 ± 5 到 91 ± 3?滋A/cm2 (见图2A, n = 7, P< 0.01) , Na+-K+-2Cl-共转运体抑制剂bumetanide (100?滋M)也有类似作用(见图2B)。

    这些结果提示促分泌物更能促进转基因鼠而不是对照组的阴离子分泌,这可能是转基因鼠更有助于排除伤害性物质的原因之一。

    2.3 cAMP依赖性信号参与转基因小鼠的结肠上皮离子转运 应用ELISA方法测定结肠上皮cAMP的含量。转基因鼠的基础含量为106.3 ± 18 pmol·mg-1 ,对照组分别为112± 7 ......

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