采用彗星实验检测32P敷贴对幼鼠骨髓细胞DNA的损伤
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摘要:目的 通过检测32P敷贴对幼鼠骨髓细胞DNA损伤,从而探讨32P体表局部敷贴对幼鼠的全身毒性效应。方法 采用彗星实验检测SD大鼠幼鼠骨髓细胞DNA水平的损伤。结论 32P体表局部敷贴照射治疗能引起SD幼鼠骨髓细胞DNA损伤,因此,婴幼儿临床中应慎用32P体表局部敷贴照射治疗,尤其应避免大剂量、长时间使用。
关键词:婴幼儿;32P敷贴;DNA损伤
32P敷贴治疗时一种广义的短距离放射性治疗方式[1]。目前被广泛地应用于婴幼儿等幼龄群体,关于其安全性的报道只是基于临床经验性的总结,研究指标不合理,设计不科学,因而其安全性一直存在争议。本研究采用彗星实验检测SD大鼠幼鼠骨髓细胞DNA水平的损伤,从而探讨32P体表局部敷贴照射治疗对幼年动物全身毒性作用,进而评价32P敷贴应用于婴幼儿患者的安全性。
1 资料与方法
1.1实验动物 清洁级SD (Sprague-Dawley)大鼠,从江西中医学院动物科学实验部购买[许可证编号:SCXK(赣)2005-0001]。选取幼鼠日龄为4~6d,同一批实验选用同一日动物。
1.2主要试剂 正常熔点琼脂糖;低熔点琼脂糖;N-十二烷基肌氨酸钠;聚乙二醇辛基苯基醚;乙二胺四乙酸二钠;Hanks' 平衡盐溶液 (无Ca2+,Mg2+);三(羟甲基)胺基甲烷;碘化丙啶染料;氯化钠;氯化钾;磷酸氢二钠;磷酸二氢钾;氢氧化钠;二甲基亚砜和盐酸等;32P敷贴器;吸水滤纸片;32P同位素溶液。
1.3主要器材 美国丹佛精密分析天平;细胞过滤筛(200目);日本Olympus像差倒置显微镜;细胞计数板;上海博迅高精度恒温水浴箱;琼脂糖水平电泳槽;像差倒置荧光显微镜;像差倒置荧光显微镜摄像系统。
1.4操作方法
1.4.1 32P体表局部敷贴贴敷SD大鼠幼鼠的动物模型的建立 选用48只6d体重相近的SD大鼠幼鼠,随机分为4组,分别命名为对照组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组,每组12只,模拟临床敷贴方法,将32P滤纸片敷贴,贴于SD大鼠幼鼠背部皮肤,并用胶带固定。对照组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组分别采用活度为0μCi、5μCi 、25μCi 、125μCi的敷贴 ......
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