生发酊的质量标准研究(1)
摘要：目的 对生发酊质量控制指标进行研究。方法 首先对生发酊中的补骨脂、何首乌、红花、黄芪、丹参进行薄层色谱鉴别，同时以补骨脂素，异补骨脂素为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量测定。结果 定性鉴别简便易行；含量测定方法中同分异构体补骨脂素、异补骨脂素分离较好，补骨脂素、异补骨脂素柱效比较理想，其理论塔板数>5000。此法分离效果好，重现性好、精密度高、加样回收率令人满意。结论 定性定量方法简便、准确，专属性强，重现性好，能有效地控制该制剂的质量。
关键词：生发酊，薄层色谱，高效液相色谱
生发酊为江苏省中医院自制制剂，主要由补骨脂、何首乌、红花、黄芪、丹参等中药组成，具有刺激毛发生长，治疗斑秃的功效。经我院皮肤科多年使用，疗效确切。为了更好地控制其质量，我们在原有气相色谱法测定乙醇含量的基础上，进一步采用薄层色谱鉴别等手段对其进行定性控制；同时以补骨脂素、异补骨脂素为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量测定。
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1实验材料
1.1仪器 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪，G1314A VWD检测器，G1311A泵，G1316A柱温箱；美国Agilent公司。Discovery C18柱(美国)。Satarius BP1100十万分之一电子分析天平(德国)。929薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器技术厂)。
1.2样品与试药
1.2.1样品 生发酊样品：由江苏省中医院制剂部提供(批号061201，070402，070403)。
1.2.2试药 对照药材：补骨脂(121056-200503)、何首乌(120934-200507)、红花(120907-200609)、黄芪(120974-200609)、丹参(120923-200610)均购于中国药品生物制品检定所。对照品：补骨脂素(0739-9907)，异补骨脂素(11073-200309)均购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用)。薄层层析用硅胶G(批号：060518)、薄层层析硅胶 GF254批号：(批号：040811)均由中国青岛海洋化工集团公司出品(国家药典委员会监制)。甲醇为色谱纯(德国Merck公司)，其他试剂均为分析纯。
, 百拇医药
2方法与结果
2.1定性鉴别
2.1.1补骨脂的鉴别 取生发酊样品适量，过滤，取滤液10 mL水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液，同法制得补骨脂阴性样品溶液；另取补骨脂对照药材粉末1 g，加乙醇20 mL，超声提取20 min，过滤，取滤液5 mL水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各2～4 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的两个蓝白色荧光斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.2何首乌的鉴别 取2.1.1项下供试品溶液，同法制得何首乌阴性样品溶液；取何首乌对照药材粉末1g，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
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2.1.3红花的鉴别 取2.1.1项下供试品溶液，同法制得红花阴性样品溶液；另取本品红花对照药材粉末1 g，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-冰醋酸-甲醇(35∶1∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃下烘5 min，供试品色谱中在与对照药材色谱相应位置上显相同紫红色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.4黄芪的鉴别 取生发酊样品适量，过滤，取滤液20 mL水浴蒸干，残渣加水溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，20 mL/次，合并正丁醇提取液，水浴蒸干，残渣加正丁醇1 mL，使其溶解，作为供试品溶液；同法制得黄芪阴性样品溶液；另取黄芪对照药材粉末2 g，加乙醇20 mL，超声提取20 min，过滤，滤液蒸干，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，用10%硫酸乙醇显色，在105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同棕褐色斑点斑点， 而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.5丹参的鉴别 取样品适量，过滤，取滤液20 mL水浴蒸干，残渣加水溶解，移至分液漏斗中，用乙醚振摇提取2次，20 mL/次，合并乙醚提取液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml，使其溶解，作为供试品溶液；同法制得丹参阴性样品溶液；另取丹参对照药材粉末2 g，加乙醇20 mL，超声提取10 min，过滤，取滤液同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视，供试品色谱中，日光下检视，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同暗红色的斑点(见图1E )，紫外灯下(254nm)检视，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同亮绿色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。, 百拇医药(戴国友 吴旭彤 孙蕾 刘睿)
关键词：生发酊，薄层色谱，高效液相色谱
生发酊为江苏省中医院自制制剂，主要由补骨脂、何首乌、红花、黄芪、丹参等中药组成，具有刺激毛发生长，治疗斑秃的功效。经我院皮肤科多年使用，疗效确切。为了更好地控制其质量，我们在原有气相色谱法测定乙醇含量的基础上，进一步采用薄层色谱鉴别等手段对其进行定性控制；同时以补骨脂素、异补骨脂素为指标成分，应用高效液相色谱法对其进行定量测定。
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1.1仪器 Agilent 1100 Series 高效液相色谱仪，G1314A VWD检测器，G1311A泵，G1316A柱温箱；美国Agilent公司。Discovery C18柱(美国)。Satarius BP1100十万分之一电子分析天平(德国)。929薄层制板器(重庆市南岸贝尔德仪器技术厂)。
1.2样品与试药
1.2.1样品 生发酊样品：由江苏省中医院制剂部提供(批号061201，070402，070403)。
1.2.2试药 对照药材：补骨脂(121056-200503)、何首乌(120934-200507)、红花(120907-200609)、黄芪(120974-200609)、丹参(120923-200610)均购于中国药品生物制品检定所。对照品：补骨脂素(0739-9907)，异补骨脂素(11073-200309)均购于中国药品生物制品检定所(供含量测定用)。薄层层析用硅胶G(批号：060518)、薄层层析硅胶 GF254批号：(批号：040811)均由中国青岛海洋化工集团公司出品(国家药典委员会监制)。甲醇为色谱纯(德国Merck公司)，其他试剂均为分析纯。
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2方法与结果
2.1定性鉴别
2.1.1补骨脂的鉴别 取生发酊样品适量，过滤，取滤液10 mL水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液，同法制得补骨脂阴性样品溶液；另取补骨脂对照药材粉末1 g，加乙醇20 mL，超声提取20 min，过滤，取滤液5 mL水浴蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各2～4 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的两个蓝白色荧光斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.2何首乌的鉴别 取2.1.1项下供试品溶液，同法制得何首乌阴性样品溶液；取何首乌对照药材粉末1g，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂展开，取出，晾干，置紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
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2.1.3红花的鉴别 取2.1.1项下供试品溶液，同法制得红花阴性样品溶液；另取本品红花对照药材粉末1 g，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-冰醋酸-甲醇(35∶1∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃下烘5 min，供试品色谱中在与对照药材色谱相应位置上显相同紫红色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.4黄芪的鉴别 取生发酊样品适量，过滤，取滤液20 mL水浴蒸干，残渣加水溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，20 mL/次，合并正丁醇提取液，水浴蒸干，残渣加正丁醇1 mL，使其溶解，作为供试品溶液；同法制得黄芪阴性样品溶液；另取黄芪对照药材粉末2 g，加乙醇20 mL，超声提取20 min，过滤，滤液蒸干，同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，用10%硫酸乙醇显色，在105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同棕褐色斑点斑点， 而阴性样品在相应的位置无斑点。
2.1.5丹参的鉴别 取样品适量，过滤，取滤液20 mL水浴蒸干，残渣加水溶解，移至分液漏斗中，用乙醚振摇提取2次，20 mL/次，合并乙醚提取液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml，使其溶解，作为供试品溶液；同法制得丹参阴性样品溶液；另取丹参对照药材粉末2 g，加乙醇20 mL，超声提取10 min，过滤，取滤液同法制得对照药材溶液。照薄层色谱法[1]试验，分别吸取供试品溶液、对照药材溶液，阴性样品溶液各5 μL，点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视，供试品色谱中，日光下检视，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同暗红色的斑点(见图1E )，紫外灯下(254nm)检视，在与对照品药材色谱相应的位置上显相同亮绿色斑点，而阴性样品在相应的位置无斑点。, 百拇医药(戴国友 吴旭彤 孙蕾 刘睿)