解脲支原体耐药性研究分析
摘要：目的 分析本地区解脲支原体(Ureaplasma urealyticum， UU)临床分离株对临床常用9种抗菌药耐药情况。方法 采用体外微量折点稀释法，应用珠海丽珠生物公司提供的试剂盒，严格按照试剂盒操作手册进行培养及药敏试验。结果 本地区UU对强力霉素、美满霉素及克拉霉素比较敏感，其次为交沙霉素和阿奇霉素，而罗红霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。结论 针对UU感染的经验治疗，应首选强力霉素、美满霉素及克拉霉素，应当尽可能根据抗菌药敏结果合理使用抗菌药治疗生殖道支原体感染。
关键词：解脲支原体；抗菌药物敏感试验；耐药
支原体属于原核微生物，缺乏细胞壁。近年来，许多研究证实支原体(UU、MH)与非淋病性尿道炎[1]、前列腺炎[2]、不育症[3]及新生儿呼吸疾病[4]等多种疾病有关。故对支原体感染的危害不容忽视。目前，临床上常用抗菌药来治疗支原体感染，而随着抗菌药的使用支原体的抗菌耐药性必然发生某些改变。为观察我地区UU、MH感染者抗菌药耐药性的变化，本文特作以下探讨。
1 资料与方法
1.1一般资料 184例来自我社区2011年3月1日～2013年6年30日妇产科等门诊患者，多为女性。临床表现为下列之一：尿频、尿不尽、尿痛、烧灼感，女性伴有白带增多、外阴红肿等症状。
1.2方法
1.2.1标本采集 男性(患者取样前至少1h内不要小便)以无菌拭子深入尿道2～4cm处，轻轻转动并停留10s后取出分泌物；女性以无菌拭子在宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处轻轻转动15～20s后取出分泌物。
1.2.2支原体培养鉴定及药敏试验 支原体培养鉴定药敏试剂盒由珠海丽珠试剂公司提供，严格按照试剂盒操作说明进行，药敏试剂有强力霉素(DOX)、美满霉素(MIN)、交沙霉素(JOS)、克拉霉素(CLA)、罗红霉素(ROX)、阿奇霉素(AZI)、氧氟沙星(OFL)、左氧氟沙星(LEV)、司帕沙星(SPA)。将尿道或宫颈拭子标本接种于现配的培养基中，挤压使拭子中标本渗入后弃拭子，充分混匀液体培养基，分别准确量取50μl至微量孔中(除C-：加有50μl培养基的空白孔) ， 再加入无菌石蜡油封盖， 35℃～37℃，24h和48h观察结果。根据每孔生长情况分别判断UU或MH鉴定及药敏试验结果。
1.3结果判断标准 阳性：支原体生长；阴性：不生长或支原体浓度小于等于104 ccu/ml。敏感(S)：两孔均为不生长；中敏( I) ： 高浓度孔不生长，低浓度孔生长；耐药(R) ：两孔均为生长。
2 结果
检测出UU单独感染阳性病例为134例， UU感染对9种抗菌药敏感结果见表1。UU单独感染时，强力霉素、美满霉素及克拉霉素比较敏感，其次为交沙霉素和阿奇霉素，而罗红霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。
3 讨论
用于临床治疗的药物大体分为三类：①喹诺酮类，如氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星等，抑制支原体的核酸的代谢；②大环内酯类如阿奇霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素，抑制支原体的蛋白合成；③半合成四环素类如美满霉素、强力霉素等，抑制蛋白质合成并使其细胞膜通透性改变，使胞内的核苷酸及其他重要成分外漏，从而抑制DNA复制。但支原体耐药机制比较复杂。研究表明[5]：大环内酯类可作为甲基化酶的诱导物，引起核糖体50S大亚基甲基化，导致作用靶点改变会引起UU对其耐药。研究认为[6]：引起支原体对喹诺酮类耐药的主要原因是靶酶-DAN解旋酶的改变。DNA解旋酶是一种Ⅱ型拓扑异构酶，有2个A亚基2个B亚基组成，分别由gyrA和gyrB编码，其残基68～107区为喹诺酮耐药区(quinolones regions of drug-resistance， QRDR)，若此区碱基突变致使编码氨基酸发生改变造成酶结构的改变，引起空间构象变化从而阻止药物进入作用部位引起耐药。但研究发现：支原体可通过转座子Tn916等从链球菌、葡萄球菌等转接tetm基因，因此有可能对四环素类产生耐药。
随着抗菌药的广泛应用耐药问题越来越严重，由于地区抗生素使用习惯不同，不同地区支原体的耐药率存在差异。本文结果表明：在本地区支原体对强力霉素、美满霉素敏感率最高。UU单独感染时，强力霉素、美满霉素及克拉霉素比较敏感，其次为交沙霉素和阿奇霉素，而罗红霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。结果提示：针对UU单独感染的经验治疗，应首选强力霉素、美满霉素及克拉霉素。而UU保持高度的敏感性的原因，可能是由于这类抗生素副作用较大，在本地较少使用有关。本地区支原体对强力霉素及美满霉素保持较高的敏感性，原因可能是本地区较少使用该类药物有关。
综上所述，支原体在本地区有较高的感染率，临床治疗应当尽可能根据抗菌药敏结果合理使用抗菌药治疗生殖道支原体感染。
参考文献：
[1]Yu JT，Tang WY， Lau KH，et al.Role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum in non-gonococcal urethritis in Hong Kong[J].Hong Kong Med J，2008，14(2)：125-129.
[2]Radoni A，Kovacevi V，Markoti A，et al.The clinical significance of Ureaplasma urealyticum in chronic prostatitis[J].J Chemother， 2009； 21(4)：465-466.
[3]Zeighami H，Peerayeh SN，Yazdi RS，et al.Prevalence of Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum in semen of infertile and healthy men[J].Int J STD AIDS，2009，20(6)：387-390.
[4]Pandey A， Dhawan B，Gupta V， et al.Clinical significance of airways colonization with Ureaplasma urealyticum in premature (<34 wk) neonates[J].Indian J Med Res， 2007，125(5)：679-684.
[5]Malewa E，Dimitrowa C.Experimental orchitis in white rats caused by Ureaplasma urealyticum[J].Zentralbl Allg Pathol，1983，128(5-6)：391-397.
[6]Soroka AE，Akopian TA，Taraskina AE，et al.Study of isolation of fluoroquinolone- resistant Ureaplasma urealyticum and identification of mutant sites[J].Chin Med J，2002，115(10)：1573-1575.编辑/成森, 百拇医药(朱少亮)
关键词：解脲支原体；抗菌药物敏感试验；耐药
支原体属于原核微生物，缺乏细胞壁。近年来，许多研究证实支原体(UU、MH)与非淋病性尿道炎[1]、前列腺炎[2]、不育症[3]及新生儿呼吸疾病[4]等多种疾病有关。故对支原体感染的危害不容忽视。目前，临床上常用抗菌药来治疗支原体感染，而随着抗菌药的使用支原体的抗菌耐药性必然发生某些改变。为观察我地区UU、MH感染者抗菌药耐药性的变化，本文特作以下探讨。
1 资料与方法
1.1一般资料 184例来自我社区2011年3月1日～2013年6年30日妇产科等门诊患者，多为女性。临床表现为下列之一：尿频、尿不尽、尿痛、烧灼感，女性伴有白带增多、外阴红肿等症状。
1.2方法
1.2.1标本采集 男性(患者取样前至少1h内不要小便)以无菌拭子深入尿道2～4cm处，轻轻转动并停留10s后取出分泌物；女性以无菌拭子在宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处轻轻转动15～20s后取出分泌物。
1.2.2支原体培养鉴定及药敏试验 支原体培养鉴定药敏试剂盒由珠海丽珠试剂公司提供，严格按照试剂盒操作说明进行，药敏试剂有强力霉素(DOX)、美满霉素(MIN)、交沙霉素(JOS)、克拉霉素(CLA)、罗红霉素(ROX)、阿奇霉素(AZI)、氧氟沙星(OFL)、左氧氟沙星(LEV)、司帕沙星(SPA)。将尿道或宫颈拭子标本接种于现配的培养基中，挤压使拭子中标本渗入后弃拭子，充分混匀液体培养基，分别准确量取50μl至微量孔中(除C-：加有50μl培养基的空白孔) ， 再加入无菌石蜡油封盖， 35℃～37℃，24h和48h观察结果。根据每孔生长情况分别判断UU或MH鉴定及药敏试验结果。
1.3结果判断标准 阳性：支原体生长；阴性：不生长或支原体浓度小于等于104 ccu/ml。敏感(S)：两孔均为不生长；中敏( I) ： 高浓度孔不生长，低浓度孔生长；耐药(R) ：两孔均为生长。
2 结果
检测出UU单独感染阳性病例为134例， UU感染对9种抗菌药敏感结果见表1。UU单独感染时，强力霉素、美满霉素及克拉霉素比较敏感，其次为交沙霉素和阿奇霉素，而罗红霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。
3 讨论
用于临床治疗的药物大体分为三类：①喹诺酮类，如氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星等，抑制支原体的核酸的代谢；②大环内酯类如阿奇霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素，抑制支原体的蛋白合成；③半合成四环素类如美满霉素、强力霉素等，抑制蛋白质合成并使其细胞膜通透性改变，使胞内的核苷酸及其他重要成分外漏，从而抑制DNA复制。但支原体耐药机制比较复杂。研究表明[5]：大环内酯类可作为甲基化酶的诱导物，引起核糖体50S大亚基甲基化，导致作用靶点改变会引起UU对其耐药。研究认为[6]：引起支原体对喹诺酮类耐药的主要原因是靶酶-DAN解旋酶的改变。DNA解旋酶是一种Ⅱ型拓扑异构酶，有2个A亚基2个B亚基组成，分别由gyrA和gyrB编码，其残基68～107区为喹诺酮耐药区(quinolones regions of drug-resistance， QRDR)，若此区碱基突变致使编码氨基酸发生改变造成酶结构的改变，引起空间构象变化从而阻止药物进入作用部位引起耐药。但研究发现：支原体可通过转座子Tn916等从链球菌、葡萄球菌等转接tetm基因，因此有可能对四环素类产生耐药。
随着抗菌药的广泛应用耐药问题越来越严重，由于地区抗生素使用习惯不同，不同地区支原体的耐药率存在差异。本文结果表明：在本地区支原体对强力霉素、美满霉素敏感率最高。UU单独感染时，强力霉素、美满霉素及克拉霉素比较敏感，其次为交沙霉素和阿奇霉素，而罗红霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星敏感率均不高。结果提示：针对UU单独感染的经验治疗，应首选强力霉素、美满霉素及克拉霉素。而UU保持高度的敏感性的原因，可能是由于这类抗生素副作用较大，在本地较少使用有关。本地区支原体对强力霉素及美满霉素保持较高的敏感性，原因可能是本地区较少使用该类药物有关。
综上所述，支原体在本地区有较高的感染率，临床治疗应当尽可能根据抗菌药敏结果合理使用抗菌药治疗生殖道支原体感染。
参考文献：
[1]Yu JT，Tang WY， Lau KH，et al.Role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum in non-gonococcal urethritis in Hong Kong[J].Hong Kong Med J，2008，14(2)：125-129.
[2]Radoni A，Kovacevi V，Markoti A，et al.The clinical significance of Ureaplasma urealyticum in chronic prostatitis[J].J Chemother， 2009； 21(4)：465-466.
[3]Zeighami H，Peerayeh SN，Yazdi RS，et al.Prevalence of Ureaplasma urealyticum and Ureaplasma parvum in semen of infertile and healthy men[J].Int J STD AIDS，2009，20(6)：387-390.
[4]Pandey A， Dhawan B，Gupta V， et al.Clinical significance of airways colonization with Ureaplasma urealyticum in premature (<34 wk) neonates[J].Indian J Med Res， 2007，125(5)：679-684.
[5]Malewa E，Dimitrowa C.Experimental orchitis in white rats caused by Ureaplasma urealyticum[J].Zentralbl Allg Pathol，1983，128(5-6)：391-397.
[6]Soroka AE，Akopian TA，Taraskina AE，et al.Study of isolation of fluoroquinolone- resistant Ureaplasma urealyticum and identification of mutant sites[J].Chin Med J，2002，115(10)：1573-1575.编辑/成森, 百拇医药(朱少亮)