穴位注射足三里对溃疡性结肠炎小鼠治疗效果的实验研究
摘要：目的 探讨穴位注射足三里治疗溃疡性结肠炎的临床效果及其治疗作用的可能机制。方法 健康SPF级SD小鼠60只，雌雄各半，分为六组，治疗1w后进行DAI及肉眼病理组织学评分。结果 模型组小鼠的DAI评分及病理学评分显著高于对照组。针刺组、穴位注射黄芪注射液组、穴位注射生理盐水组、SASP组的DAI评分及病理学评分显著低于模型组，单纯针刺效果弱于穴位注射黄芪注射液组，单纯针刺和穴位注射生理盐水组无明显差异。结论 穴位注射黄芪注射液对于小鼠实验性溃疡性结肠炎有一定的疗效， 效果优于单用针刺足三里、穴位注射盐水组、SPAP组。
关键词：穴位注射；黄芪注射液；足三里；溃疡性结肠炎
溃疡性结肠炎又称非特异性溃疡性结肠炎(UC)，是一种慢性直肠和结肠炎性疾病。近年来，选用黄芪注射液穴位注射治疗UC在临床上取得较满意效果。本研究运用溃疡性结肠炎动物模型证实其治疗作用，为仿穴位注射治疗慢性溃疡性结肠炎的临床应用提供可靠的实验依据。
1 资料与方法
1.1一般资料 健康SPF级SD小鼠60只，雌雄各50%，体重约25g左右，购于鲁抗动物，在实验室内正常饲养1w，均为健康，随机分为6组 ，每组10只，各组体重统计学比较无显著差异(P>0.05)。
1.2药物与试剂 柳氮磺吡啶肠溶片(上海信谊天平药业有限公司)，三硝基苯磺酸(国药集团)，黄芪注射液(神威药业集团有限公司，批号：Z13020999)。
1.3实验设备 显微镜。
1.4方法
1.4.1实验造模 小鼠适应性饲养1w后，除正常对照组外，禁食不禁水24h，固定小鼠后，用带7号针头硅胶导管从肛门插入至场内4cm，注入200微升由50%乙醇和5mgTNBS组成的混合药液将，倒置小鼠30s，使药液到达全结肠，然后放回全笼饲养。
1.4.2实验分组与治疗方法 60只小鼠随机分为6组，每组雌雄各50%，每组各10只。
1组：针刺组。穴取足三里，进针后，实行捻转补法，针刺1次/d，连续针灸1w；两组：穴位注射黄芪组。穴取足三里，注射黄芪注射液，注射1次/2d，注射1w；3组：穴位注射生理盐水组。穴取足三里，注射生理盐水，注射1次/2d，注射1w；4组：SASP组。使用SASP水溶液灌胃，灌胃1次/2d，灌胃1w；5组：模型组。造模后不治疗，与治疗组做相同的捆绑固定；6组：正常组。作为各项指标的正常对照。
治疗1w后，各组大鼠禁食不禁水24h，全麻下取远端结肠约8cm，沿纵轴剪开肠管并用冰盐水冲洗干净，平铺、固定，观察炎症及溃疡发生情况，进行局部结肠大体损伤评分。然后取病变明显处结肠2cm标本经40g/L甲醛固定、石蜡包埋后切片进行HE染色，光镜下观察炎症浸润、黏膜糜烂及溃疡等情况。
1.5观察指标
1.5.1疾病活动评分(DAI) 每日记录动物体重、毛发状态、大便性状和便血情况，进行疾病活动评分(DAI)。疾病活动评分(DAI)=(体重下降分数+大便性状分数+便血分数)/3。
1.5.两组织学损伤评分 光镜下观察炎症浸润、黏膜糜烂及溃疡等情况，采用Fedorak积分标准进行组织学损伤评分。
1.6统计学处理 采用SPSS16.0统计软件处理，各项指标用均数或均数±标准差(x±s)表示，两组组间比较分别采用t检验及方差分析。
2 结果
见表1。
造模各组在造模后第2d即出现疾病发作，模型组在整个实验过程中炎症持续，无明显自愈倾向；而相对于模型组，各组在治疗后出现DAI降低(P<0.05)，提示各种治疗均可改善小鼠溃疡性结肠炎炎症程度；穴位注射黄芪组DAI、组织学损伤评分、结肠炎症指数评分低于单纯针刺组、穴位生理盐水注射组和SPAP组；针刺组、生理盐水穴注组、之间各指标间无统计学差异。
病理切片(HE染色)结果显示，空白组小鼠结肠结构完整，腺体清晰，无炎症细胞浸润；对照组小鼠结肠结构不完整，腺体破坏，大量炎症细胞浸润；盐水组小鼠结肠结构不完整，腺体破坏，大量炎症细胞浸润；黄芪组小鼠结肠结构完整，腺体清晰，隐窝完整，少量炎症细胞浸润；针刺组小鼠结肠结构轻度破坏，腺体不完整，部分炎症细胞浸润。
3 讨论
现代医学普遍认为UC是多种致病因素相互作用的结果，其中与免疫机制密切相关，是以遗传因素为背景，感染和环境因素通过启动肠道免疫和非免疫系统，致使肠粘膜对抗原呈现高敏反应，发生免疫调节功能紊乱，释放大量细胞因子和炎症介质，导致肠粘膜炎症和组织的损伤[1]。而中医认为本病病位在大肠，属中医"久痢"、"血痢"、"滞下"等范畴，其病因病机为感受邪毒， 局部经络阻塞， 气滞血瘀， 血肉腐败所致[2]，《素问·太阴阳明论》说："饮食不节， 起居不时者， 阳受之则入六腑， 阴受之则入五脏， ……入五脏则腹满闭塞， 下为飧泄， 久为肠"。
本实验研究表明，黄芪注射液穴位注射具有药物和穴位双重效果，一方面利用刺激足三里以调理肠胃的作用，另一方面强化了黄芪药物的作用，具有一举两得的效果，具有起效快、疗效高、无毒副作用的优点，值得临床推广应用。
参考文献：
[1]崔海宏，陈村龙，杨玉捷，等.溃疡性结肠炎患者肠黏膜Th1/Th2类细胞因子mRNA的表达[J].世界华人消化杂志，2003，11(10)：1524-1526.
[2]赵恒志，郭玉兰. 健脾祛湿汤治疗慢性溃疡性结肠炎46 例[J].河南中医学院学报， 2005， 20(4)：64.
[3]杨甲三. 针灸腧穴学[M].上海：上海科学技术出版社， 1989： 145.
编辑/哈涛, 百拇医药(宋婷婷 徐慧颖 袁琦)
关键词：穴位注射；黄芪注射液；足三里；溃疡性结肠炎
溃疡性结肠炎又称非特异性溃疡性结肠炎(UC)，是一种慢性直肠和结肠炎性疾病。近年来，选用黄芪注射液穴位注射治疗UC在临床上取得较满意效果。本研究运用溃疡性结肠炎动物模型证实其治疗作用，为仿穴位注射治疗慢性溃疡性结肠炎的临床应用提供可靠的实验依据。
1 资料与方法
1.1一般资料 健康SPF级SD小鼠60只，雌雄各50%，体重约25g左右，购于鲁抗动物，在实验室内正常饲养1w，均为健康，随机分为6组 ，每组10只，各组体重统计学比较无显著差异(P>0.05)。
1.2药物与试剂 柳氮磺吡啶肠溶片(上海信谊天平药业有限公司)，三硝基苯磺酸(国药集团)，黄芪注射液(神威药业集团有限公司，批号：Z13020999)。
1.3实验设备 显微镜。
1.4方法
1.4.1实验造模 小鼠适应性饲养1w后，除正常对照组外，禁食不禁水24h，固定小鼠后，用带7号针头硅胶导管从肛门插入至场内4cm，注入200微升由50%乙醇和5mgTNBS组成的混合药液将，倒置小鼠30s，使药液到达全结肠，然后放回全笼饲养。
1.4.2实验分组与治疗方法 60只小鼠随机分为6组，每组雌雄各50%，每组各10只。
1组：针刺组。穴取足三里，进针后，实行捻转补法，针刺1次/d，连续针灸1w；两组：穴位注射黄芪组。穴取足三里，注射黄芪注射液，注射1次/2d，注射1w；3组：穴位注射生理盐水组。穴取足三里，注射生理盐水，注射1次/2d，注射1w；4组：SASP组。使用SASP水溶液灌胃，灌胃1次/2d，灌胃1w；5组：模型组。造模后不治疗，与治疗组做相同的捆绑固定；6组：正常组。作为各项指标的正常对照。
治疗1w后，各组大鼠禁食不禁水24h，全麻下取远端结肠约8cm，沿纵轴剪开肠管并用冰盐水冲洗干净，平铺、固定，观察炎症及溃疡发生情况，进行局部结肠大体损伤评分。然后取病变明显处结肠2cm标本经40g/L甲醛固定、石蜡包埋后切片进行HE染色，光镜下观察炎症浸润、黏膜糜烂及溃疡等情况。
1.5观察指标
1.5.1疾病活动评分(DAI) 每日记录动物体重、毛发状态、大便性状和便血情况，进行疾病活动评分(DAI)。疾病活动评分(DAI)=(体重下降分数+大便性状分数+便血分数)/3。
1.5.两组织学损伤评分 光镜下观察炎症浸润、黏膜糜烂及溃疡等情况，采用Fedorak积分标准进行组织学损伤评分。
1.6统计学处理 采用SPSS16.0统计软件处理，各项指标用均数或均数±标准差(x±s)表示，两组组间比较分别采用t检验及方差分析。
2 结果
见表1。
造模各组在造模后第2d即出现疾病发作，模型组在整个实验过程中炎症持续，无明显自愈倾向；而相对于模型组，各组在治疗后出现DAI降低(P<0.05)，提示各种治疗均可改善小鼠溃疡性结肠炎炎症程度；穴位注射黄芪组DAI、组织学损伤评分、结肠炎症指数评分低于单纯针刺组、穴位生理盐水注射组和SPAP组；针刺组、生理盐水穴注组、之间各指标间无统计学差异。
病理切片(HE染色)结果显示，空白组小鼠结肠结构完整，腺体清晰，无炎症细胞浸润；对照组小鼠结肠结构不完整，腺体破坏，大量炎症细胞浸润；盐水组小鼠结肠结构不完整，腺体破坏，大量炎症细胞浸润；黄芪组小鼠结肠结构完整，腺体清晰，隐窝完整，少量炎症细胞浸润；针刺组小鼠结肠结构轻度破坏，腺体不完整，部分炎症细胞浸润。
3 讨论
现代医学普遍认为UC是多种致病因素相互作用的结果，其中与免疫机制密切相关，是以遗传因素为背景，感染和环境因素通过启动肠道免疫和非免疫系统，致使肠粘膜对抗原呈现高敏反应，发生免疫调节功能紊乱，释放大量细胞因子和炎症介质，导致肠粘膜炎症和组织的损伤[1]。而中医认为本病病位在大肠，属中医"久痢"、"血痢"、"滞下"等范畴，其病因病机为感受邪毒， 局部经络阻塞， 气滞血瘀， 血肉腐败所致[2]，《素问·太阴阳明论》说："饮食不节， 起居不时者， 阳受之则入六腑， 阴受之则入五脏， ……入五脏则腹满闭塞， 下为飧泄， 久为肠"。
本实验研究表明，黄芪注射液穴位注射具有药物和穴位双重效果，一方面利用刺激足三里以调理肠胃的作用，另一方面强化了黄芪药物的作用，具有一举两得的效果，具有起效快、疗效高、无毒副作用的优点，值得临床推广应用。
参考文献：
[1]崔海宏，陈村龙，杨玉捷，等.溃疡性结肠炎患者肠黏膜Th1/Th2类细胞因子mRNA的表达[J].世界华人消化杂志，2003，11(10)：1524-1526.
[2]赵恒志，郭玉兰. 健脾祛湿汤治疗慢性溃疡性结肠炎46 例[J].河南中医学院学报， 2005， 20(4)：64.
[3]杨甲三. 针灸腧穴学[M].上海：上海科学技术出版社， 1989： 145.
编辑/哈涛, 百拇医药(宋婷婷 徐慧颖 袁琦)
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