EGF—Linker—TCSKDEL融合蛋白的构建及表达产物的纯化(2)
1.5 EGF-Linker-TCSKDEL的纯化 IPTG诱导大肠杆菌表达EGF-linker-TCSKDEL3 h，超声波破碎菌体，离心后取上清液，用Ni-NTA Agrose亲和纯化，纯化的样品做聚丙烯酰胺凝胶电泳。2 结果
2.1 EGF-linker-TCSKDEL的PCR扩增 扩增的EGF-linker-TCSKDEL基因纯化后经1%琼脂糖凝胶电泳，在900bp处可见特异性扩增带，见图1。
图1 EGF-linker-TCSKDEL的PCR扩增
2.2 EGF-linker-TCSKDEL表达载体的构建 与pET28a载体连接的EGF-linker-TCSKDEL基因片段转化至JM105菌后经PCR鉴定为阳性菌落，扩大培养，提取质粒。用SphI/EcoRI和NcoI/EcoRI双酶切鉴定 ......
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