1.3.3.2冰冻切片的制作及荧光显微镜观察拍照 从标本盒中取出各组织块将其平放于特制小盒内，加适量OCT包埋剂完全淹没组织，将气泡用吸头洗出；然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内，使小盒底部接触液氮，约20 s组织即迅速冰冻成块。在样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织置于其上(放置组织时注意把气管、支气管的纵轴向上)，再添一层OCT胶，使其完全覆盖组织，然后置于切片机中的冷冻台上，在-20℃条件下放置2 min后进行切片，切片的厚度为10 μm，将切好的切片置于载玻片上，放在冰盒内保存，冰冻切片制作过程中尽量避免光线直接照射。切片完毕后送至暗室内使用激光共聚焦显微镜观察并拍照。

    1.4 统计学处理 采用SPSS(17.0版)计算机数据分析处理软件，数据以均数±标准差表示，组组均数之间两两对比采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

    2结果

    2.1壳聚糖纳米粒的制备及荧光标记 通过对壳聚糖的亲水、疏水改性及FITC反应得到如下特征的荧光标记的壳聚糖纳米粒：其基本理化性质：粒径：253 nm±9 nm，表面电位：12.3mV±1.2 mV。

    2.2在体雾化后各组之间气管粘膜上的荧光强度分析比较 在体实验雾化后，在激光共聚焦显微镜下可见三组实验动物气道粘膜上皆有绿色荧光显示 ......