局部组织工程室诱发组织新生的实验研究(2)
2.1组织工程室中组织的大体观察及体积测量
新西兰大白兔对手术操作耐受良好，28 d取材时，麻醉后由原切口入路：实验组中见组织工程室表面覆盖包膜，其内脂肪瓣未充满小室。可见脂肪瓣轴心血管保留完好。新生脂肪表面包膜明显，但质地较软，颜色较鲜红，无明显条索。脂肪瓣体积较前明显增大，形状为长条形，与原始形状基本相同(见图1)。使用排水法测量体积为(11.17±1.97)ml，增大(744± 132)%。28 d时，脂肪瓣体积与原始体积对比，明显增大，且差异有统计学意义(P<0.05)。腹股沟对照组中，脂肪组织表面无明显包膜，颜色较苍白，亦无明显条索，肉眼观察脂肪体积无明显增大，排水法对照测量体积为(0.87± 0.08)ml，增大(174±17)%。28 d时，实验组与对照组相比，脂肪瓣增大倍数有显著差异(P<0.05)，见图2。
2.2组织形态学观察
14 d时，可见脂肪中出现小脂肪细胞群，提示脂肪新生的可能性。并可见到部分炎性细胞，及大量纤维结缔组织地长入。28 d时，HE显示完整的单房脂肪细胞，脂肪组织形态基本成熟，未见明显增生的细胞外基质，并能发现增厚的包膜，见图3。
, 百拇医药
3 讨论
本次实验所构建局部脂肪工程室模型基本成功，所有实验兔对手术操作造成的创伤及置入的硅胶小室均耐受良好。实验选用自身对照，去除了由实验动物在实验期间本身带来的误差和全身因素的影响。实验组的体积增大和最终体积均十分可观。与原始体积相比，最终体积的增大具有显著的统计学差异(P<0.05)。增大的体积与传统组织工程室模型相当[4]。并且，脂肪瓣的形状与原始形状基本相同。这提示，局部组织工程室可能不仅仅作用于工程室内的局部脂肪组织，单单引发工程室内部的脂肪组织增大。而是引发了整个脂肪瓣的体积均匀地增大。
在进一步的组织形态学的观察中，也佐证了脂肪瓣新生的猜测。从HE切片上，在14 d时，我们观察到明显的间质纤维条索成分，穿插于其中，还有成簇的小脂肪细胞，伴或伴有新生血管。我们认为，这种现象是典型的组织新生的形态学证据。并且有报道提示，脂肪工程室中的新生表现为一个完整的无菌炎症过程。与传统认识的炎症相比，组织工程室内的炎症能引发其中组织新生的原因虽尚不明确[5-6]，但从组织形态学观察，本实验过程中也经历了典型的炎症反应过程。
, 百拇医药
综上所述，组织工程室不仅能引发工程室内的脂肪新生，亦可引发工程室外组织的再生。这种再生是由轴心血管传递或是由组织工程室中渗出液引发，需进一步实验探索与明确。
参考文献：
[1]Findlay M W，Dolderer J H，Trost N，et al.Tissue-engineered breast reconstruction：bridging the gap toward large-volume tissue engineering in humans[J].Plast Reconstr Surg，2011，128(6)：1206-1215.
[2]Hofer S O，Knight K M，Cooper-White J J，et al.Increasing the volume of vascularized tissue formation in engineered constructs：an experimental study in rats[J].Plast Reconstr Surg，2003，111(3)：1186-1192，1193-1194.
, 百拇医药
[3]Zhan W，Marre D，Mitchell G M，et al.Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber[J].J Vis Exp，2016(111).
[4]Wan J，Dong Z，Lei C，et al.Generating an Engineered Adipose Tissue Flap Using an External Suspension Device[J].Plast Reconstr Surg，2016，138(1)：109-120.
[5]Peng Z，Dong Z，Chang Q，et al.Tissue engineering chamber promotes adipose tissue regeneration in adipose tissue engineering models through induced aseptic inflammation[J].Tissue Eng Part C Methods，2014，20(11)：875-885.
[6]Debels H，Galea L，Han X L，et al.Macrophages play a key role in angiogenesis and adipogenesis in a mouse tissue engineering model[J].Tissue Eng Part A，2013，19(23-24)：2615-2625.
編辑/王朵梅, 百拇医药(雷忱 王彪)
新西兰大白兔对手术操作耐受良好，28 d取材时，麻醉后由原切口入路：实验组中见组织工程室表面覆盖包膜，其内脂肪瓣未充满小室。可见脂肪瓣轴心血管保留完好。新生脂肪表面包膜明显，但质地较软，颜色较鲜红，无明显条索。脂肪瓣体积较前明显增大，形状为长条形，与原始形状基本相同(见图1)。使用排水法测量体积为(11.17±1.97)ml，增大(744± 132)%。28 d时，脂肪瓣体积与原始体积对比，明显增大，且差异有统计学意义(P<0.05)。腹股沟对照组中，脂肪组织表面无明显包膜，颜色较苍白，亦无明显条索，肉眼观察脂肪体积无明显增大，排水法对照测量体积为(0.87± 0.08)ml，增大(174±17)%。28 d时，实验组与对照组相比，脂肪瓣增大倍数有显著差异(P<0.05)，见图2。
2.2组织形态学观察
14 d时，可见脂肪中出现小脂肪细胞群，提示脂肪新生的可能性。并可见到部分炎性细胞，及大量纤维结缔组织地长入。28 d时，HE显示完整的单房脂肪细胞，脂肪组织形态基本成熟，未见明显增生的细胞外基质，并能发现增厚的包膜，见图3。
, 百拇医药
3 讨论
本次实验所构建局部脂肪工程室模型基本成功，所有实验兔对手术操作造成的创伤及置入的硅胶小室均耐受良好。实验选用自身对照，去除了由实验动物在实验期间本身带来的误差和全身因素的影响。实验组的体积增大和最终体积均十分可观。与原始体积相比，最终体积的增大具有显著的统计学差异(P<0.05)。增大的体积与传统组织工程室模型相当[4]。并且，脂肪瓣的形状与原始形状基本相同。这提示，局部组织工程室可能不仅仅作用于工程室内的局部脂肪组织，单单引发工程室内部的脂肪组织增大。而是引发了整个脂肪瓣的体积均匀地增大。
在进一步的组织形态学的观察中，也佐证了脂肪瓣新生的猜测。从HE切片上，在14 d时，我们观察到明显的间质纤维条索成分，穿插于其中，还有成簇的小脂肪细胞，伴或伴有新生血管。我们认为，这种现象是典型的组织新生的形态学证据。并且有报道提示，脂肪工程室中的新生表现为一个完整的无菌炎症过程。与传统认识的炎症相比，组织工程室内的炎症能引发其中组织新生的原因虽尚不明确[5-6]，但从组织形态学观察，本实验过程中也经历了典型的炎症反应过程。
, 百拇医药
综上所述，组织工程室不仅能引发工程室内的脂肪新生，亦可引发工程室外组织的再生。这种再生是由轴心血管传递或是由组织工程室中渗出液引发，需进一步实验探索与明确。
参考文献：
[1]Findlay M W，Dolderer J H，Trost N，et al.Tissue-engineered breast reconstruction：bridging the gap toward large-volume tissue engineering in humans[J].Plast Reconstr Surg，2011，128(6)：1206-1215.
[2]Hofer S O，Knight K M，Cooper-White J J，et al.Increasing the volume of vascularized tissue formation in engineered constructs：an experimental study in rats[J].Plast Reconstr Surg，2003，111(3)：1186-1192，1193-1194.
, 百拇医药
[3]Zhan W，Marre D，Mitchell G M，et al.Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber[J].J Vis Exp，2016(111).
[4]Wan J，Dong Z，Lei C，et al.Generating an Engineered Adipose Tissue Flap Using an External Suspension Device[J].Plast Reconstr Surg，2016，138(1)：109-120.
[5]Peng Z，Dong Z，Chang Q，et al.Tissue engineering chamber promotes adipose tissue regeneration in adipose tissue engineering models through induced aseptic inflammation[J].Tissue Eng Part C Methods，2014，20(11)：875-885.
[6]Debels H，Galea L，Han X L，et al.Macrophages play a key role in angiogenesis and adipogenesis in a mouse tissue engineering model[J].Tissue Eng Part A，2013，19(23-24)：2615-2625.
編辑/王朵梅, 百拇医药(雷忱 王彪)