1.3分化液的配制

    1.3.1分化液的成份 经摸索实验条件，MSC的扩增培养和传代使用MSCM培养液，分化时换用DMEM培养液分化更好。分化液的配制：在50 ml DMEM完全培养液中加入胰岛素、IBMX、地塞米松、罗格列酮和T3;维持液的配制：在50 ml DMEM完全培养液中加入胰岛素、罗格列酮和T3。所有药品加入后0.22 μm濾器过滤于新的灭菌50 ml离心管，4 ℃保存。

    1.3.2分化用药品的配制 短效胰岛素：50 ml培养液中加入60 μl。IBMX的工作浓度为0.5 mM，称取IBMX粉剂 222.2 mg，溶于2 ml DMSO，配成1000×母液，用时50 ml培养液中加入IBMX母液50 μl。地塞米松工作浓度为5 μm，称取3.92 mg地塞米松，加入1 ml DMSO，配成10000×母液，用时在50 ml培养液中加入地塞米松母液5 μl。罗格列酮的工作浓度为1 μm，称取0.357 mg罗格列酮，加入1 ml DMSO，配成1000×母液，用时在50 ml培养液中加入罗格列酮母液5 μl;T3工作浓度为1 nm ......