1.2方法

    1.2.1仪器、试剂 美国ABI 7500型实时荧光定量PCR分析仪，JIDI-4D-WS自动平衡实验室离心机。培养基包括：SS培养基;麦康凯培养基;亚硝酸盐增菌培养基;GN增菌培养基分离/增菌培养;双糖铁培养基;三糖铁培养基。

    1.2.2细菌培养 培养基内接种粪便标本，温度控制在37℃，培养24 h 后将可疑菌落挑出，并进行生化鉴定，血清型由血清凝集反应判断。阳性标准：有典型菌落出现，经生化鉴定，提示志贺菌感染。

    1.2.3 PCR技术检测 引物选择：扩增志贺ipaH基因片段引物碱基序列。从培养14 h的SS琼脂平板菌落中提取DNA，接种单菌落于LB或脑心平板，不间断的连续画线，在37℃培养18～24 h。再取150 μl蒸馏水，与其充分混合数接种环菌苔，在100℃水煮10 min，离心后取上清液，并于零下20℃存放待检测。使用PBS缓冲液洗涤、沉淀后再次离心 ......