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编号:13844552
宜昌地区妇女人乳头瘤病毒感染状况分析(2)
http://www.100md.com 2020年4月23日 《医学信息》 202016
     1对象与方法

    1.1研究对象 选取2019年1~12月三峡大学附属仁和医院检验科检查的3354例患者,年龄17~70岁,其中<25岁161例、25~35岁1079例、35~45岁1076例、45~55岁834例、≥55岁204例。

    1.2方法

    1.2.1仪器试剂 检测所用试剂盒及仪器均由潮州凯普生物化学有限公司提供。

    1.2.2标本采集 由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈,将宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针转5圈,慢慢取出宫颈刷,将其放入有患者编号的取样管中,取样管内已加有专用细胞保存液,拧紧瓶盖,送检样本,如不能马上送检样本,于4 ℃保存,并在2个星期内进行检测,可在-20 ℃长期保存。

    1.2.3检测方法 ①DNA分离提取:首先,取保存有宫颈细胞的细胞保存液0.5 ml,以14000 rpm离心1 min,弃上清液后,利用潮州凯普生物化学有限公司的细胞裂解液提取DNA,最后,取1 μl抽提好的DNA样本作为模板进行PCR扩增,剩余DNA样品存贮于-20°C备用。②PCR扩增:反应体系为25 μl,包括PCR混合液23.25 μl,DNA聚合酶0.75 μl,DNA模板1 μl,扩增条件是95℃ 9 min ......
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