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编号:447768
17β-雌二醇对人成骨肉瘤细胞CLCF1 基因表达的影响
http://www.100md.com 2024年5月1日 医学信息 2021年第3期
阴虚证,荧光素酶,1材料与方法,2结果,3讨论
     (福建省中医药科学院基础研究室,福建 福州 350003)

    绝经后骨质疏松症(postmenopausal Osteoporosis,PMOP)是一种与衰老有关的常见病,主要发生在绝经后妇女,是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征,导致骨脆性增加,易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。研究显示,绝经后骨质疏松症以肾阴虚为主[1,2]。前期研究发现[1],CLCF1 是PMOP 肾阴虚证的关联基因,CLCF1 在PMOP 肾阴虚证组的表达水平明显低于健康对照组,但其失调的原因尚未可知。女性绝经后雌激素水平下降,骨偶联过程失调,这是PMOP 发生的主要原因[3]。雌激素在维持骨代谢动态平衡方面扮演着非常重要的角色,PMOP 肾阴虚证患者雌激素水平对CLCF1 基因表达是否有影响,目前尚未见报道。因此本研究通过体外观察17β-雌二醇对MG-63 细胞CLCF1 表达的影响,旨在揭示CLCF1 基因在PMOP 肾阴虚证的表达调控机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂及仪器 本实验于2019 年4 月~2020 年8月在福建省中医药科学院完成。人骨肉瘤细胞MG-63 购自中国科学院上海细胞库,主要试剂包括无酚红a-MEM 培养基(Thermo fisher 公司)、胰酶(Hyclone 公司)、胎牛血清FBS、牛血清白蛋白BSA(Sigma 公司)、17β-雌二醇(MCE)、雌激素受体抑制剂氟维司群(MCE 公司)、Dual-Luciferase Reporter Assay System(Promega 公司)。主要仪器涉及酶标仪(Tecan 公司,Infinite M1000),实时荧光定量PCR 仪(ABI 公司,7500 FAST)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 复苏冻存的MG-63 细胞 ......

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