殷佳辉，王 琪，孙宇辰，朱晓峰，乔 峰，邹志田

    (1.佳木斯大学附属第一医院心胸外科，黑龙江 佳木斯 154002；2.佳木斯大学基础医学院，黑龙江 佳木斯 154002；3.佳木斯传染病医院检验科，黑龙江 佳木斯 154002；4.佳木斯大学生命科学学院，黑龙江 佳木斯 154002)

    间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一种具有自我更新能力和多向分化能力的多能干细胞[1-4]。病理状态下，间充质干细胞可以在炎症介质的刺激下，通过迁移和归巢作用参与损伤部分的修复[5]，也可以通过静脉或局部注射路径迁移到损伤部位，进而发挥一系列生物效应[6]。因MSCs表面表达低水平Ⅰ型白细胞抗原(HLA)，不表达Ⅱ型主要组织相容性抗原(MHC-Ⅱ)和T细胞共刺激分子，具有低免疫原性，可为异体MSCs治疗提供理论依据[7]。急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)是急性肺损伤(ALI)最严重的形式，病死率较高，目前尚无特异有效的治疗措施[8]，因此研究的重点仍是寻找有效的治疗方法。本研究对胎牛肺间充质干细胞(lung-derived mesenchymal stem cells，LMSCs)进行分离培养及鉴定，并通过腹腔注射LPS造小鼠急性肺损伤模型，然后将LMSCs移植到急性肺损伤的小鼠体内，观察LMSCs对急性肺损伤治疗作用，为异源干细胞进行临床治疗提供实验理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料来源 本实验对象3个月龄胎牛购自中国农科院家畜实验基地，6周龄雄性小鼠购自北京华阜康生物有限公司。LPS购自北京索莱宝科技有限公司，α-MEM培养基、胎牛血清(FBS)、山羊血清、谷氨酰胺购自美国GIBCO公司；胰蛋白酶(Trypsin 1∶250)、Triton X-100IV型胶原酶、PI购自美国Sigma公司；多聚甲醛和青链霉素购自北京化工厂；小鼠抗牛抗体购自Abcam公司产品；FITC标记兔抗小鼠二抗购自中杉金桥；RNA提取试剂盒TRI reagent、反转录试剂盒和extap酶购自TaKaRa公司 ......