基于网络药理学及体外实验探讨桔梗皂苷D对肝癌细胞迁移侵袭的影响及相关机制
靶标,通路,1材料与方法,2结果,3讨论
郭园园,张浩然,2,卓士铉,杨万斌,傅鹤群,李雅静,张正光(1.南京中医药大学医学院·整合医学学院,江苏 南京 210023;2.南京医科大学基础医学院,江苏 南京 211166)
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种常见消化道恶性肿瘤,死亡率很高。据报道[1],全球每年因罹患肝癌而死亡的人数超过50 万,其中我国作为肝癌大国,约占总数的50%。目前临床上常使用放化疗和手术切除法治疗肝癌。由于肝癌发病具有一定隐匿性,一旦确诊即为晚期,仅有20%的患者能够接受手术治疗[2]。此外,肝癌具有很强的转移侵袭性,手术愈后不佳,而化学药物治疗往往存在疗效不显著以及毒副作用强等弊端[3]。因此,寻求一种天然、高效、安全的抗肝癌药物,尤其是寻找能够抑制肿瘤细胞转移的药物迫在眉睫。桔梗皂苷D(Platycodin D,PD)作为临床传统中药桔梗的药效物质基础之一,具有抗炎、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤等多种药理学功效[4-7]。已有研究表明[8-11],PD 能够有效抑制如胆囊癌细胞、口腔鳞状细胞癌细胞、子宫内膜癌细胞、多发性骨髓瘤细胞等多种肿瘤细胞的迁移侵袭,而关于PD 抑制肝癌细胞迁移侵袭的相关机制尚未完全阐明。人肝母细胞瘤细胞系(human hepatocellular liver carcinoma,HepG2)是目前应用最广泛的人源肝癌细胞系之一,常作为药物研究的肝癌体外细胞模型。本研究通过网络药理学及体外实验方法,初步探究了PD 抑制肝癌HepG2 细胞迁移及侵袭的潜在分子机制,以期为临床应用PD 治疗肝癌提供相关研究基础,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞、实验试剂与器材 人肝母细胞瘤(人肝癌)HepG2 细胞株(中国科学院上海生科院细胞资源中心);DMEM、新生胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、青霉素链霉素双抗(Penicillin-Streptomycin)、胰酶(含0.25%EDTA,酚红)(美国Gibco 公司);桔梗皂苷D 药物粉末(上海源叶生物科技有限公司);磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS,江苏凯基生物技术股份有限公司);细胞增殖-毒性检测(CCK-8)试剂盒(biosharp 公司);Transwell 小室、Matrigel 基质胶(美国Corning-Costar 公司)。
1.1.2 实验仪器 酶标仪(Bio Tek Instruments Inc.);电泳仪(上海天能科技有限公司);凝胶成像系统(Bio-Rad Laboratories 公司);超净台(苏州苏洁净化设备有限公司);高速冷冻离心机、低温冰箱、电子分析天平、PCR 仪(美国Thermo Fisher 公司);显微镜(Olympus Corporation);细胞培养箱(上海宝赛生物科技有限公司) ......
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