安 洁，信栓力，刘吉祥，常 超，赵秀峰，郑 杰，连晶晶

    (邯郸市第一医院心内一科1，神外一科2，河北 邯郸 056002)

    血管壁由外膜、中膜及内膜构成，其中血管平滑肌细胞(VSMCs)占据的比例最高。在正常血管中，VSMCs 主要发挥收缩舒张功能，表现为收缩表型，在细胞发育过程及某些病理状态下，细胞受到各种生化因子、机械刺激、细胞外基质组分改变等因素的影响，伴随着α-SMA、SM-MHC 等收缩基因表达下调、细胞过度增殖、细胞迁移、细胞外基质分泌增多等一系列细胞特性改变[1]，VSMCs 发生细胞表型转换由收缩型向合成型转化[2]。VSMCs 表型转换既是对刺激的一种适应性反应，也参与了多种心血管疾病的发病过程，但其具体机制目前尚不完全明确，有待进一步阐明。MBNL1 属于盲肌样蛋白家族，是一种重要的RNA 结合蛋白，主要功能是调控多种前体mRNA 的选择性剪接[3]、调控mRNA 运输及定位[4]。选择性剪接是一种转录后调控机制，经选择性剪接可以产生同一基因的不同蛋白异构体，进而发挥不同生物作用。MBNL1 的缺失是强直性肌营养不良的发病机制之一[5，6]，提示MBNL1 对于肌源性细胞的发育分化起着至关重要的作用。既往研究表明MBNL1 可以调控骨骼肌及心肌的分化发育及病理过程的发生[5-8]。然而关于MBNL1 在血管平滑肌中的研究较少。因此，本研究旨在观察MBNL1 在VSMCs 表型转换中的作用，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及材料 雄性SD 大鼠，体重150～200 g，由华中科技大学实验动物中心提供，实验动物饲养于SPF 级动物房，提供12 h 光照，食水充足，所有实验均符合实验动物管理规定；DMEM 培养基、青霉素-链霉素溶液、0.25%胰蛋白酶-EDTA 购于吉诺生物公司；胎牛血清购于Bioind 公司；BCA 试剂盒、PVDF 膜、Alexa Fluor594标记抗小鼠IgG抗体、Lipofectamine 2000 购于赛默飞世尔科技公司；Ⅱ型胶原酶、弹力蛋白酶购于Worthington 公司；大鼠PDGF-bb 购于金斯瑞生物公司；抗-MBNL1 抗体、抗-a-sma 抗体、抗-a-tubulin 抗体、HRP 偶联抗兔IgG 抗体、HRP 偶联抗鼠IgG 抗体购于三鹰生物公司；siRNA 购于锐博生物公司 ......