李 春，梅 聪，周 琼，朱丽芹，王毅鹏，翁晓春，周松兰，唐 哲

    (昆明市延安医院内分泌科，云南 昆明 650051)

    随着人们生活水平的提高，非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)对人类健康的危害也越来越大[1，2]。NAFLD 包括单纯性脂肪肝(nonalcoholicsimple fatty liver，NAFL)、脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)、肝纤维化、肝硬化，甚至进展为肝细胞癌等一系列相互联系的病理改变[3]。与单纯NAFLD 患者相比，NASH 的存在增加了肝脏疾病的风险，也可能增加心血管疾病和恶性肿瘤等非肝脏相关疾病的风险[4-6]。NAFLD 发病机制复杂，“二次打击”理论(Two hit theory)其中之一，第一次打击诱发肝脏脂肪变性，第二次打击来自氧化应激引起炎症、纤维化、坏死等[7]。Kupffer 细胞在经典激活(M1)和选择性激活(M2)两种状态之间的转换可能也在NAFLD 的发生发展过程中发挥重要作用[8，9]。基于此，本研究通过高脂饮食建立NAFLD 的小鼠模型，动态观察小鼠肝脏的Kupffer细胞在疾病的发展和演变过程中的变化，分析其在炎症募集和炎症持续机制中的作用，明确Kupffer 细胞在M1 和M2 之间的转换与NAFLD 发病机制的关系，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与材料 30 只C57BL/6J 小鼠购自中科院上海实验动物中心，PBS 溶液：将1 包磷酸缓冲液(phosphate-buffered saline，PBS)粉剂(购自索莱宝)完全溶解于2000 ml 蒸馏水中，混匀后，调整pH 值在7.2～7.4 备用。4%多聚甲醛：将40 g 多聚甲醛(购自Sigma)完全溶解于加热的1000 ml 蒸馏水中，恢复室温后备用。甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、胰岛素和血糖试剂盒购自Elabscience ......