赵方新，李 怡，张 烜，陆景坤，牛 燕，丁 枫，武建强

    (内蒙古医科大学基础医学院医学实验中心，内蒙古 呼和浩特 010110)

    斑马鱼作为动物疾病模型相较于传统的啮齿动物模型具有独特优势，已广泛应用于医药卫生、毒理检验以及环境科学等众多领域[1]。斑马鱼肝脏的细胞表型与哺乳动物高度相似，拥有相同的功能，包括胆汁分泌、糖原和脂质储存、胰岛素反应、异种物质和氨代谢等[2]，因此众多学者利用斑马鱼作为动物模型在肝病、肝功能等方面进行研究。油红O(Oil Red O，ORO)属于偶氮染料，具有很强的脂溶性和染脂性，在脂类中的溶解度比在溶剂中大，可与甘油三酯结合呈小脂滴状，滴于冰冻组织切片时油红O 溶于组织内的脂质(脂滴)中，使其呈橘红色，因此油红O 染色技术可以用来鉴定肝脏组织脂肪沉积情况，具有细胞定位功能作用，有助于判断及定性疾病[3，4]。斑马鱼脂肪肝病模型日渐成熟，冰冻切片油红O 染色技术更是研究脂肪性肝病的必要选择，但因斑马鱼肝脏结构与常用啮齿类动物差别大，体量微小，质地薄软，使用油红O 染色时斑马鱼肝组织的前处理以及切片厚度、染色时间以及步骤尚无统一标准。为了今后科研工作中斑马鱼肝脏疾病模型鉴定和研究提供技术参考，本研究利用斑马鱼肝组织冰冻切片，以探索不同前处理步骤、切片厚度、染色时间等条件下，最佳的斑马鱼肝脏组织油红O 染色方法。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 野生AB 型斑马鱼，3 月龄，上海费曦生物科技有限公司；4%多聚甲醛，Biosharp；异丙醇等，天津市鑫铂特化工有限公司；油红O，苏木素染液，甘油明胶封片剂，北京索莱宝科技有限公司；OCT 包埋剂，日本樱花；粘附载玻片，盖玻片，江苏世泰实验器材有限公司；冷冻切片机，台式显微镜等由内蒙古医科大学医学实验中心提供。

    1.2 方法

    1.2.1 染色液以及脱水溶液的配置 ①油红O 染色液：称取油红O 粉末500 mg 溶于100 ml 异丙醇适度震荡制成油红O 饱和储备液 ......