不同民族前列腺癌患者癌组织miRNA 表达差异研究
高通量,1材料与方法,2结果,3讨论
王文光,王玉杰,刘强,马军,李前进,木拉提·热夏提,阿斯木江·阿不拉(新疆医科大学第一附属医院泌尿外科,新疆 乌鲁木齐 830054)
前列腺癌(prostate cancer)已成为男性最常见的恶性肿瘤,居男性常见肿瘤第2位,仅次于肺癌。目前主要通过血清前列腺特异性抗原(PSA)的筛查来进行疾病的诊断与预后判断[1]。但由于PSA 水平容易受到炎症水平、良性前列腺增生等因素的影响,存在特异性及敏感性不高的问题。因此,寻找侵入性更低、特异性及灵敏度更高的前列腺癌诊断标志物成为研究人员关注的热点。已有文献报道[2-5],miRNA 能通过调控多种靶基因及其信号通路调控前列腺癌发生与发展。近年来有研究发现[6,7],miRNA 在乳腺癌、结肠癌等肿瘤患者中表达存在一定差异,而这种差异可能与不同民族癌症的发病率及死亡率有一定相关性。本研究采用高通量技术对汉族、维吾尔族及哈萨克族前列腺癌患者及汉族前列腺增生患者进行全面的miRNA 表达谱分析及验证,以获得与民族相关的差异miRNA 表达谱,为该疾病在不同民族发病差异研究方面提供新的线索,同时验证其作为前列腺癌诊断标志物的潜在价值,为下一步筛选疾病特异的诊断标志物提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 标本来源 选取2020 年10 月-2021 年8 月新疆医科大学第一附属医院收治的病理确诊为前列腺腺癌患者39 例及前列腺增生患者18 例。将前列腺癌患者依据民族分为汉族18 例、维吾尔族18 例、哈萨克族3例,并分别设为汉族前列腺癌组(HANC)、维吾尔族前列腺癌组(WEIC)、哈萨克族前列腺癌组(HAC),而汉族前列腺增生患者设为汉族前列腺增生组(HANN)。
1.2 纳入及排除标准 纳入标准:经病理确诊为前列腺癌的初治患者;穿刺病理结果显示13 针均为阳性患者;HANN 组为穿刺病理确诊的良性前列腺增生患者。排除标准:有其他部位肿瘤病史。
1.3 方法 收集前列腺癌患者穿刺标本,置BD 冻存管中,液氮快速冷冻后,-80 ℃冰箱保存待测。根据纳入及排除标准挑选符合要求的组织标本。
1.3.1 RNA 的提取 总RNA 提取及文库构建由上海欧易生物医学科技有限公司完成。取前列腺癌患者标本汉族3 例、维吾尔族3 例、哈萨克族3 例及汉族前列腺增生标本3 例。在液氮中分别将样品研磨后,加1.5 ml TRIzol 裂解液,组织研磨后使组织细胞充分裂解,离心取上清液,抽提纯化样品的总RNA。采用Nanodrop 仪器(赛默飞,美国)定量 ......
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