质谱鉴定联合直接快速药敏试验在细菌血流感染中的应用
铜绿,埃希菌,革兰,1材料与方法,2结果,3讨论
张小云,刘 本,连建春,姜玉章,唐朝贵,王 霞(南京医科大学附属淮安一院检验科,江苏 淮安 223300)
血流感染(blood stream infection,BSI)是临床常见的严重感染性疾病,具有起病急、病死率高的特点[1]。研究发现[2-5],早期适当的抗菌药物治疗可以改善血流感染患者的预后,而每延迟1 h 治疗,患者死亡率会增加9%,而血培养为诊断血流感染的“金标准”,其血液培养阳性的周转时间(turn-around time,TAT),即抗微生物药物敏感性试验报告结果是72~96 h。因此,改进方法缩短微生物鉴定和药敏试验的报告时间是目前微生物学检验面临的巨大挑战之一。研究发现[6],利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术可对血培养阳性标本进行快速直接鉴定且具有较高的准确性。欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)已经提出了抗微生物快速药敏试验(rapid drug sensitivity test,RAST),该方法是从阳性血培养瓶中取出标本直接进行药敏试验[7,8]。本研究应用MALDI-TOF MS 对细菌进行快速菌种鉴定,同时参考EUCAST 中血培养RAST 方法对肠杆菌目细菌和铜绿假单胞菌的血培养阳性标本进行药敏试验,并将结果与常规细菌鉴定和MIC 药敏结果进行对比,为建立血培养阳性标本快速鉴定及药敏试验方法提供依据。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集南京医科大学附属淮安一院检验科微生物室2021 年8 月-2022 年3 月血培养报警阳性标本共133 份(报警时间<48 h),将同一人的同一天报警的重复标本及2 种以上菌混合感染的标本剔除。
1.2 仪器试剂 Bactec FX 全自动血培养仪和血培养瓶(美国BD 公司)、真空采血管(浙江龚东医疗器械有限公司)、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪质谱仪(法国生物梅里埃有限公司)、琼脂培养基(郑州安图生物工程股份有限公司)、药敏纸片(赛默飞世尔科技<中国>有限公司)、细菌培养箱(赛默飞世尔科技<中国>有限公司);全自动微生物鉴定及药敏分析系统VITEK2 Compact(法国梅里埃生物有限公司)、离心机(赛默飞世尔科技<中国>有限公司) ......
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