生脉散对H2O2 损伤PC12 细胞保护作用的研究
存活率,空白对照,氧化应激,1材料与方法,2结果,3讨论
谭晓君,杨心怡,张雪杨,刘 薇,刘 昆,罗楚萱,刘小柳,吴都督,陈 稚(1.广东医科大学药学院,广东 东莞 523808;2.深圳罗湖人民医院医学实验室,广东 深圳 518002)
阿尔兹海默症(Alzheimer disease,AD)是一种起病隐匿的神经系统退行性疾病,其发病率逐年上升。国际阿尔茨海默病协会(ADI)在2021 年阿尔兹海默症的报告中指出,全球有超过5500 万人患有失智症[1],该病已成为现代社会健康难题。褪黑素是目前临床上防治AD 常见的抗氧化剂,但其不能从根本上治疗AD,并且具有不可忽视的副作用[2]。因此,研究开发新的防治AD 的抗氧化剂尤为重要。许多中药或中药提取物都具有抗氧化的作用,并展示出其作为抗氧化剂对于治疗AD 的巨大潜力[3]。中药提取物成分具有较高的活性以及较少的副作用等优势,能从多个途径来抑制氧化应激导致的神经元凋亡[4,5]。黄芪主要有效成分可通过多种途径来保护氧化损伤的PC12 细胞[6],红景天苷不仅可以清除自由基,保护氧化损伤的神经细胞[7],地黄饮子可以减少线粒体损伤导致的氧化应激,减少脂质过氧化,抵抗过度的自由基带来的损伤[8]。生脉散(Shengmai-san,SMS)是有800 余年历史的经方,源自于《医学启源》卷下:“补肺中元气不足”,其组成有人参、麦冬、五味子等。三药合用,具有益气养阴、保肺生脉的功效,是补肺养心的经典方[9]。《医方论·卷三·清暑之剂》所云:“肺主气,心主血,生脉散养心肺之阴,使气血得以荣养一身”。现代药理研究表明[10],SMS 能改善神经系统,并具有抗氧化的作用。近年来,许多研究者探讨了关于SMS 抗氧化和改善老年痴呆的作用。由于PC12 细胞常被用于构建氧化应激损伤的细胞模型[11,12]。因此,本实验拟以PC12 细胞为模型,观察SMS 对PC12 细胞增殖的影响,检测氧化损伤前后PC12 细胞各指标量的变化,并探讨SMS 保护PC12细胞氧化应激损伤的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料 人参、麦冬、五味子(广东时珍制药有限公司);神经细胞株PC12 细胞(上海细胞库);L-DMEM、H-DMEM 培养基(美国GIBCO 公司);磷酸盐缓冲溶液(PBS,Solarbio 公司);胎牛血清(FBS,美国GIBCO 公司);含EDTA 的0.25%胰蛋白酶消化液(吉诺生物公司);H2O2溶液(分析纯,Sigma);CCK8试剂盒(日本同仁化学研究所);二甲基亚砜(DMSO,Solarbio 公司);细胞裂解液(RIPA ......
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