王艺馨，符德元

    (1.扬州大学医学院，江苏 扬州 225000；2.苏北人民医院甲状腺乳腺外科，江苏 扬州 225000)

    乳腺癌(breast cancer，BC)仍是目前全球女性死亡的主要原因。随着乳腺癌筛查和新治疗策略的普及，患者5 年生存率已高达90%，然而其发病率及死亡率仍呈增长趋势[1，2]。并且由于乳腺癌的高度异质性，具有相同亚型和TNM 分期也可出现截然不同的预后[3]。因而，急需寻找有潜力为乳腺癌患者早期发现、诊断、治疗以及预测预后的新型生物标志物。铜(Cu)是生物体所必需的微量金属元素，而金属离子过多或过少都会导致细胞死亡[4]。Tsvetkov P等[5]在研究携带铜离子的细胞死亡过程中发现了一种新的细胞死亡模式，涉及胞内铜离子，并受其调节，称为铜死亡(cuproptosis)。铜死亡是通过铜与三羧酸循环的脂酰化成分直接结合发生的，引起脂酰化蛋白质聚集和随后的铁硫簇蛋白丢失，最终导致蛋白质毒性应激致细胞死亡。MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA 分子，通过降解mRNA 或抑制mRNA 翻译成蛋白质来调控广泛的生物过程[6]。另外，研究发现miRNAs 可通过调节缺氧、铁死亡等途径参与癌症的进展、转移和免疫治疗反应[7，8]。然而目前缺乏对乳腺癌中miRNAs 在铜死亡过程中的功能作用的研究，以及在预测乳腺癌患者预后中的作用。本研究构建了铜死亡相关miRNAs 的预后模型，以评估其与乳腺癌患者预后关系，旨在为乳腺癌的早期诊断以及治疗提供新的方向。

    1 资料与方法

    1.1 数据的获取与处理 从TCGA-GDC 数据库(https://portal.gdc.cancer.gov/)下载获得乳腺癌患者完整的miRNA 数据和RNA-seq 数据以及临床信息数据，并通过Perl 软件进行数据整理。TCGA 数据库向公众免费开放，因此不需要额外的伦理证明。

    1.2 铜死亡相关基因与miRNA 的筛选 通过R 软件limma 包对铜死亡相关基因与miRNA 进行Pearson相关性评估。若｜r2|>0.3；P<0.001，则被认为显著相关。edgeR 包用于比较筛选肿瘤样本和正常样本之间的差异的mRNA 和铜死亡相关的差异的miRNA，过滤标准为FDR<0.05 和|log2FC|>1。

    1.3 预后基因筛选及模型构建 收集患者临床资料，通过R 软件survival 包对铜死亡相关差异表达基因行单因素Cox 分析得到预后相关基因(P<0.05) ......