双向电泳分析结晶型NiS诱发人支气管上皮细胞恶变后的蛋白表达差异
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摘要:[目的]建立双向凝胶电泳分析方法,比较结晶型NiS诱发人支气管上皮细胞恶变后的蛋白表达差异。[方法]采用一步法分别提取人支气管上皮细胞系16HBE细胞和结晶型NiS诱发该细胞系的恶性转化细胞N-2细胞的可溶性总蛋白,经双向凝胶电泳分离银染显色、用双向电泳凝胶图像分析软件ImageMaster2D3.10分析两者之间可溶性蛋白的差异表达。[结果]获得了分辩率和重复性较好的双向电泳银染图谱。图像分析显示在恶性转化细胞中检测到19个新的蛋白点,同时有47个蛋白点消失,有140个蛋白点在两种细胞中表过量有显著差异,其中89个蛋白点在N-2细胞中表达升高,51个蛋白点在N-2细胞中表达降低。[结论]双向电泳技术分析NiS诱发细胞恶性转化后蛋白质组发生了变化,这将为镍致癌相关的蛋白的研究和鉴定奠定基础。
关键词:结晶型NiS;人支气管上皮细胞;恶性转化细胞;蛋白质组;双向电泳
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