基于ＧＡＤＤ153启动子的环境致癌物快速筛选系统研究

http://www.100md.com 2006年10月1日 张 荣 石 丹 李华文 郝巧玲 吕 斌 周宜开

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     摘要： [目的]构建快速检测环境中痕量致癌物DNA损伤效应的重组人肝细胞株。 [方法]构建含生长抑制与DNA损伤基因153(GADDl53)启动子和萤光素酶报告基因的重组稳定转染人肝肿瘤HepG2细胞；发光检测不同致癌物对稳定转染细胞的DNA损伤效应；同时RT-PCR检测内源性GADDl53mRNA的表达；彗星试验(Cometassay)检测DNA的损伤效应。[结果]稳定转染GADDl53-LUC细胞株可检出多环芳烃、芳香胺、重金属、农药等已知环境致癌物以及实际水样中的含量。检测结果与彗星试验结果相比，大多数检测下限均低于彗星试验的检测限，其中对苯并芘、氯化镉和2—氨基芴的检测灵敏度分别高于彗星试验1000、300和100倍；对Aems试验不敏感的重金属、四氯化碳、氟化钠等重组细胞株具有较高的检测灵敏性。10μmol/L的氯化镉可诱导内源性GADDJ53mRNA和萤光素酶活性表达增加，相关分析表明两者具有良好的相关性(r²=0.9539)。 [结论] 重组细胞株GADDl53-LUC细胞可快速检测环境中痕量污染物的DNA损伤效应。

    关键词：生长抑制与DNA损伤基因153启动子；萤光素酶报告基因；重组细胞；环境致癌物

    文章编号：1006-3617(2006)05—0376—05

    中图分类号：X171

    文献标识码：A

    http://www.100md.com/html/paper/1006-3617/2006/05/03.htm

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