贫铀对体外培养成骨细胞的毒性作用(2)

http://www.100md.com 2007年8月17日 项希桥 朱国英 王莉华 严敏芬 陈 晓

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     1.2.2 成骨细胞的鉴定 用倒置相差显微镜观察成骨细胞形态，NBT/BCIP染色试剂盒进行细胞ALP染色，显微镜下观察拍照。

    1.2.3 DU对成骨细胞增殖的影响(MTT法) 将第2代对数生长期细胞以2.5×103/孔接种于96孔板，每组12复孔。待细胞汇合后染毒。DU染毒剂量分别为0.001 95、0.003 9、0.007 8、0.015 6、0.031 2 mg/ml，对照组加入相同体积的生理盐水(空白对照)或低浓度HNO3(HNO3对照即试剂对照)。继续在5% CO2、37℃的恒温培养箱中培养24、48、72 h后终止培养。测定前4 h，用PBS冲洗后更换无血清MEM培养液100 μl，同时加入10 μl 0.5% MTT，培养箱中孵育4 h，加入150 μl 10% SDS，37℃ 水浴振荡2 h，冷却至室温后在酶标仪上570 nm处测定每孔的吸光度值(D570)。结果与空白对照和HNO3对照比较。

    1.2.4 DU对成骨细胞ALP活性的影响(PNPP偶氮法) 细胞接种同增殖率测定。DU染毒剂量分别为0.001 95、0.003 9、0.007 8、0 ......

    http://www.100md.com/html/paper/1006-3617/2007/03/05-1.htm

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