大气细颗粒物染毒致Ｃ57ＢＬ／6和Ｃ3Ｈ／Ｈｅ品系小鼠基因表达的差异(2)

http://www.100md.com 2007年8月17日 曹 强 张 澍 姜智海 董 晨 蒋蓉芳 宋伟民

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     1.2 动物分组

    雄性C57BL/6和C3H/He品系小鼠各12只，体重20 g，由中国科学院动物部提供。所有的小鼠均饲养在清洁级动物房中，依照体重，将C57BL/6(B6)、C3H/He(C3)品系小鼠随机分成4组，每组6只。分别是B6染毒组(B6+)，B6不染毒组(B6-)，C3染毒组(C3+)和C3不染毒组(C3-)。染毒剂量为10 mg/kg体重，不染毒组给予生理盐水。

    1.3 染毒方法

    采用气管滴注的方式染毒，染毒量1.5 ml/kg体重，每天1 次，连续染毒2 d，末次染毒24 h后处死动物，取肺组织且立即置于液氮中。

    1.4 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)

    采用TRIzol的方法抽提肺部的总mRNA，通过匀浆、分离、RNA沉淀、RNA洗涤和RNA溶解5个步骤获得组织的RNA；然后严格遵照逆转录试剂盒(Fermentas Life Sciences公司)将RNA逆转录成cDNA。最后用PCR的方法扩增目的片段，分析基因Gapdh、Cxcl2、C4、Hc、Cp、Igh-6和Cap1的表达情况。表1显示所使用的引物 ......

    http://www.100md.com/html/paper/1006-3617/2007/03/12-1.htm

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