洗液一号主要药效学及皮肤毒性的实验研究(1)
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摘要：目的：观察洗液一号抑菌、抗炎、止痒的药理作用及安全性。方法：液体试管抑茵、小鼠耳廓二甲苯致炎、大鼠角又菜胶足跖肿胀、磷酸组织胺致瘁、皮肤急性毒性、长期毒性、过敏、皮肤及粘膜刺激等实验。观察洗液一号的最小抑茵浓度、止痒、抗炎的药理作用厦皮肤粘膜毒性。结果：洗液一号对多种常见阴道炎致病茵具抑制作用，能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度角叉莱胶所致的大鼠足跖肿胀，能明显提高豚鼠致瘁阈，未发现皮肤粘膜毒性。结论：洗液一号具有抑茵、抗炎、止痒作用且安全。
关键词：洗液一号；阴道炎；抑菌；抗炎；止痒；皮肤毒性
中图分类号：R285.5
文献标识码：A
文章编号：1007—2349(2007)06—0038—03
洗液一号是攀枝花市中心医院用于临床多年治疗妇女阴道炎的院内制剂。为了探求洗液一号的主要药理作用及客观评价其安全性，对洗液一号进行了体外抑菌、抗炎、止痒等药效学及皮肤、粘膜毒性的实验研究，现报道如下。
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1材料
1.1动物ICR封闭群小鼠，体重(21±2)g，动物级别；清洁级，合格证号：云卫动管9806号。SD大鼠，体重(190±20)g，动物级别：清洁级，合格证号：云卫动管1305号。家兔，体重1.9～2.1kg，动物级别：普通级，合格证号：云卫动管0001208。豚鼠，体重250～300g，动物级别：普通级。均由昆明医学院重点实验室及动物科提供。
1.2药物及试剂洗液一号，浓度67%，攀枝花市中心医院提供，批号：20010411。临床用量用法：150ml/次，温水稀释至500～1000mI(含原生药8g/m1)，每日3次，外洗。洁尔阴，四川省成都思威公司制药厂，批号：010703；二甲苯，汕头市达濠精细化学品公司，批号：20000802。
1.3仪器电子分析天平，型号：BOSCH—SAE200，德国；足跖容积测量仪(自制)。
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2方法
2.1最低抑菌浓度(MIC)测定以供试品无菌取药lml(洁尔阴原浓度，洗液一号67%浓度)，用无菌肉汤lml作倍比稀释，采用液体试管抑菌法(检测管8支，药物对照管1支，细菌对照管1支)，加入菌量0.1ml(3X106/m1)，培养18小时，然后将以上培养物分别定量转种至琼脂平板中培养18小时，观察记录实验结果。
2.2洗液一号对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 参照文献，将50只小鼠随机分为5组，每组10只。各组分别为：对照组(蒸馏水)；洁尔阴组(30%)；洗液一号高、中、低剂量组(67%、34%、17%，)。实验当日各组小鼠右耳前后两面涂药一次(O.1m1)，对照组涂以等量蒸馏水。1h后各给药组以蒸馏水洗去药液，用于棉球擦净。采用二甲苯(25μl/每耳)致小鼠耳廓肿胀法，观察记录各组小鼠左右耳片重量，计算肿胀度(即左右耳片重量之差值)，并求出抑肿率。
, 百拇医药 2.3洗液一号对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响参照文献将50只大鼠随机分为5组，每组10只。分组同方法
2.2。涂药前以改良容积法测定各组大鼠右后足(踝关节以下)体积，然后各组大鼠右后足跖部涂药0.2mI/只，对照组涂以等量蒸馏水，1h后给各组大鼠右后足跖皮下注射角叉菜胶(0.05ml/只)致炎，同时再涂药一次(对照组仍涂以等量蒸馏水)，分别于致炎后1、2、3、4、5h用改良容积法测量各组大鼠的右后足体积。计算肿胀度(即致炎前后足跖体积的差值)，并求出抑肿率。
2.4洗液一号对磷酸组织胺致豚鼠搔痒作用的影响参照文献将豚鼠随机分为4组，每组8只。分组同方法2.2。于试验前一日将各组豚鼠右后足背剪毛，分别外涂相应药物或蒸馏水(0.1ml/100g)。试验当日用砂纸擦伤豚鼠右后足背部剪毛处，面积约2cm2，局部再次涂相应药物或蒸馏水(0.1ml/100g)。10min后，用0.1%磷酸组织胺分别滴在各组豚鼠的创面处(0.05ml/只/次)，此后每隔3min滴一次，直至出现豚鼠回头舔右后足擦伤皮肤动作为止。记录并比较各组涂抹组织胺次数及致痒阈(最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组织胺累积用量)。
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2.5皮肤急性毒性试验体重(20±2)g小鼠，雌雄各半。参照文献，随机分为5组，每组10只，洗液一号给小鼠一次皮下注射给药(试药剂量范围：20～160g/kg；组距：1：0.5943;给药体积：0.1m/10g)，连续观察7天内动物毒性反应及死亡情况，并用点斜法计算LD50及LD50的95%可信限。
2.6皮肤长期毒性试验体重(155±10)g大鼠，雌性。参照文献，设高、中、低3个剂量组，每组动物30只。高、中、低三个剂量浓度分别为200%、100%、20%(该浓度相当于临床推荐用药浓度的10、5、1倍)。洗液一号给雌性大鼠皮肤、粘膜(大腿内侧、阴道、会阴、肛门周围)涂药，连续涂药21天(为临床验证用药周期的3倍)。
2.7皮肤刺激性实验1.9～2.1kg家兔8只，雌雄各半。参照文献，随机分为完整和破损皮肤2组，采用同体自身对比法，用赋形剂作对照，观察67%洗液一号Iml外用对家兔完整皮肤和破损皮肤的刺激作用。
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2.8粘膜刺激性实验参照文献将1.9～2.1kg雌性家兔，随机分为受试组与对照组，每组4只分别阴道注入洗液一号和灭菌生理盐水(0.2ml/只/次)，每隔1h1次，共计5次。观察其有无全身毒性反应。24h后处死家兔，肉眼和镜检观察阴道粘膜有无充血和水肿等反应。如有死亡则对主要脏器进行病理检查。
2.9主动皮肤过敏实验(ACA)，将250～300g豚鼠30只随机分为3组，受试药(67%洗液一号)组、阴性对照(清洁饮用水)组及阳性对照(2、4二硝基氯代苯)组，每组10只，雌雄兼用。进行致敏与激发试验(受试区3X 3cm2，受试物量为0.2m1)。按皮肤过敏反应评分标准对皮肤红斑、水肿进行评分。计算致敏反应发生率。按皮肤致敏性评价标准对皮肤致敏性进行评价。
2.10统计方法采用SPSS8.0统计软件对实验数据进行方差分析。
3结果
3.1最低抑菌浓度(MIC)测定洗液一号对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、真菌中的白色念珠菌和石膏样小孢子菌均有不同程度的抑菌作用。对金黄色葡萄球菌及变形杆菌抑菌作用效果尤为显著，MIC与洁尔阴接近。结果见表1。
3.3洗液一号对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响洗液一号高、中低剂量组能明显抑制角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀，与阴性对照组比较差异有显著性意义(P
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