2.1脾淋巴细胞的制备小鼠脱脊椎处死，无菌取其脾脏。将脾脏用玻璃片磨碎，过膜，于1200 rpm离心5 min。弃去上清，沉淀加入红细胞裂解液(每个脾脏约1 mL)，混匀，静置1分钟，加入PBS，离心。再加入PBS，过膜，离心。将所剩细胞洗涤1～2次后，用含10%FBS的RPMI-1640将细胞调至所需浓度。

    2.2MTT法测定丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖功能小鼠脾脏淋巴细胞(4×105个/孔)接种于96孔板，加入不同浓度的受试物，同时加入ConA(终浓度1μg/ml)或LPS(终浓度10μg/ml)，另设无刺激剂的本底对照。于37℃，5% CO2培养箱中作用48h，MTT法检测丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖功能。

    2.3RT-PCR检测IL-2、IFN-γ和T-bet mRNA基因表达因表达，用序列单环己基铵ed ymmunomodulatin-脾淋巴细胞(5×106个/孔)接种于anti-CD3 mAb抗体(5μg/ml)包被的24孔板中，加入黄芪皂苷II(30nM)，另设相应溶媒对照和无刺激本底对照，于37℃，5% CO2培养箱培养16h后，收集细胞，Trizol一步抽提法提取总RNA，反转成cDNA，PCR检测检测IL-2、IFN-γ和T-bet mRNA基因表达 ......