姜黄素联合PDTC体外抗白血病K562细胞的作用研究(2)
1.5Western blot方法检测Cleaved Caspase 3的表达活性取对数生长期细胞,加药后培养48 h,收集细胞,以PBS洗涤细胞2次,加入RIPA裂解液(含1 mmol·L-1的PMSF)冰上裂解10 min。13000 r·min-1离心10 min,吸取上清,得到细胞总蛋白。用BCA法进行蛋白定量,取30 μg蛋白与上样缓冲液混合,95℃变性5 min。12% SDS-PAGE凝胶中电泳,转至PVDF膜上,5%脱脂奶粉封闭1 h,加入一抗后4℃孵育过夜,TBST洗涤3次,每次10 min,加入二抗室温孵育50 min,TBST洗涤3次,每次10 min,加入ECL增强型化学发光试剂,置于凝胶成像系统成中成像[6]。
1.6统计学分析采用SPSS17.0软件进行统计分析,所有数据以形式表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为有统计意义。
2结果
2.1姜黄素联合PDTC可增强对K562细胞增殖的抑制作用K562细胞经不同浓度姜黄素作用后 ......
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