PRP(富含血小板血浆):制备APG的关键

    APG制备的核心环节就是自体PRP的制备。患者外周静脉血经离心、分离、浓缩即可制得PRP。

    血浆分离置换法 血浆分离置换法,利用多功能医用血成分自动分离设备通过预设程序在一个封闭系统中离心2次得到PRP或浓缩血小板成分。

    Daniel等率先使用血小板分离机制备PRP,并用于整形外科手术切口取得了较好效果。加拿大学者使用血小板分离机PCCS制备PRP可使血小板浓度增加5.5倍。宋扬等进一步改良设备,使得2次离心在同一个容器内完成,简化了程序和污染的机会,制得PRP血小板数量为1 192.88×109/L(浓度增加8.55倍),血小板回收率为59.88%。

    这种改良法自动化程度高、操作便捷、不易污染、可控性好、安全高效,制得的PRP中血小板纯度和浓度均高,具有良好的应用前景。但所需血量相对较多,一般>150 ml,或需建立静脉循环通道,在采集血小板后对其他液血成分进行回输。另外,设备昂贵等因素都限制了其推广。

    离心分离法制备 人工操作分离PRP差异较大,血小板浓度也不一样。我们研究发现,先以2 000 rpm(313×g力)离心4分钟,用巴氏管吸取上部的血浆及靠近界面1 mm的红细胞转移到另一离心管中;再进一步以4 000 rpm(1 252×g力)离心6分钟,可见在底部薄层的红细胞上沉积有白膜样物质,即血小板沉积层,其上部为含有极少量未沉降血小板的血浆层,用巴氏管吸取上部大部分血浆,剩余部分血浆及血细胞成分;然后在静置30分钟后轻轻振摇离心管,使红细胞和血小板重悬于剩余的血浆中,即得到PRP,其血小板数量为1 363.80×109/L,比离心浓度前提高5.91倍,血小板回收率为75.2% ......