沙棘总黄酮对大鼠脑内单胺类神经递质的影响(2)
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参见附件。
主要的试剂、仪器：①试剂：沙棘总黄酮(TFH)购自青海康普生生物制药有限公司。DA、NE、5-HT标准品均购自Sigma公司。②仪器：960荧光分光光度计，高速低温离心机，电子天秤。
方法：①TFH注射液的配制：称取沙棘总黄酮，按比例加入双蒸水，用1 mol/LNaOH调pH至7.2。②给药：SD大鼠腹腔注射10%的水合氯醛麻醉，给药组按100 mg/kg股静脉给予沙棘总黄酮，分别在给药后10分钟、30分钟、60分钟、120分钟、240分钟、360分钟、480分钟时间点处死大鼠，在冰上迅速取出全脑，去除小脑后，将脑组织称重，置3 ml预冷的酸性正丁醇中。对照组大鼠股静脉只给等量的双蒸水。③匀浆：脑组织匀浆后倒入离心管内，再按重量补足正丁醇(1 g脑组织：30 ml酸性正丁醇)。匀浆液于快速混匀器中混匀1分钟，3×103 r/min，离心10分钟，倾出上清液。④测神经递质荧光值：分别取1.5 ml各样品的正丁醇上清液，测定NE、DA吸光值。因两者在碱性条件下与碘试剂反应，生成三羟基吲哚化合物和二羟基吲哚化合物，且均具有较强的荧光性；再分别取1.0 ml各样品的正丁醇上清液，测定5-HT吸光值，因5-HT在碱性条件下，可与邻苯二甲醛缩合，形成具有荧光的化合物。上述递质的荧光强度与浓度在一定范围内呈直线关系，其浓度可通过测定其荧光强度来定量。对照组给予同样体积的双蒸水代替沙棘总黄酮，其余操作同给药组。具体操作过程是参照张燕、王洪斌等的测定神经递质的方法[9]。
统计学处理：各组数据用(x±s)表示，采用单因素方差分析及SPSS13.0统计软件处理。
结 果
TFH对大鼠脑内5-HT含量的影响，见表1。
TFH对大鼠脑内NE含量的影响，见表2。
TFH对大鼠脑内DA含量的影响，见表3。
不同时间点SD大鼠脑内NE、DA、5-HT含量，见图1 ......
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