生脉饮复方制剂对病毒性心肌炎细胞凋亡作用的研究(2)
方法:①心室肌细胞培养:大鼠打开胸腔,取出心室肌,放入缓冲液中洗涤,剪取心室肌组织经胰酶37℃水浴消化10分钟后,1000 rpm离心,反复数次,收集沉淀的细胞。按照细胞悬液5×106/mL密度种植于96孔板,置于37℃5%CO2培养箱中培养。②CVB3感染心室肌细胞:大约72小时后,光镜下观察细胞已贴壁,将CVB3病毒株作连续10倍稀释,接种于96孔板心室肌细胞,1小时后,弃去病毒液,加入培养液。③生脉饮干预:病毒感染24小时后,分别加入药物进行干预。生脉饮干预组:每天加生脉饮、100TCID50CVB3、DMEM后继续培养;辅酶Q10组:每天加辅酶Q10、100TCID50CVB3、DMEM后继续培养;病理模型组:每天加100TCID50CVB3 + DMEM;正常对照组:常规细胞液培养。④心肌细胞形态观察:心肌细胞采用苏木素-伊红(HE)染色 ......
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