电压门控快钾通道蛋白Kv4.3的抗体制备及检测
Kv.,MAPs,westernblotting,免疫沉淀
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邓小云 刘宇 蔡芳 潘乾 龙志高 夏昆 夏家辉 张灼华 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室 中南大学医学遗传学国家重点实验室
【摘要】Kv4(voltagegatedK+channel4)是在哺乳动物心脏和脑组织中广泛表达的一类钾离子通道蛋白.它主要介导心肌细胞和神经细胞中的A-型(快速失活型)K+电流,是构成中枢神经系统和心肌细胞中的快速失活外向型电流的基础.Kv4.3是电压门控钾离子通道3种α亚基之一.通道中含有许多具有调节作用的辅助亚基,它们通过与Kv4.3互作实现对通道的调节.本研究根据人类氨基酸序列以MAPs法制备抗Kv4.3抗体.MAP由4条相同的17肽段连接成锥形结构分子.以MAP或MAP与佐剂免疫新西兰白兔,抽提了免疫前血清和免疫后血清,并对抗体的滴度进行评价.MAPs在白兔体内诱导出了效价比为1:1000的抗Kv4.3特异性抗体.
【关键词】 Kv. MAPs westernblotting 免疫沉淀
【基金】国家自然科学基金资助项目(30170454;30123006;30300101)
【分类号】Q813.2
电压门控钾离子通道(voltage-gatedpotassiumchannel,Kv)是一类非常复杂的离子通道家族.它主要由4个同源或异源的α亚基形成四聚体复合物,复合物中间形成一个供钾离子通过的孔道.绝大多数已克隆的Kv通道α亚基基因归为4个亚家族:Kv1(Shaker)、Kv2(Shab)、Kv3(Shaw)、Kv4(Shal)
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摘 要：Kv4(voltage gated K+ channel4)是在哺乳动物心脏和脑组织中广泛表达的一类钾离子通道蛋白。它主要介导心肌细胞和神经细胞中的A-型(快速失活型)K+电流，是构成中枢神经系统和心肌细胞中的快速失活外向型电流的基础。Kv4.3是电压门控钾离子通道3种α亚基之一。通道中含有许多具有调节作用的辅助亚基，它们通过与Kv4.3互作实现对通道的调节。本研究根据人类氨基酸序列以MAPs法制备抗Kv4.3抗体。MAP由4条相同的17肽段连接成锥形结构分子。以MAP或MAP与佐剂免疫新西兰白兔，抽撮了免疫前血清和免疫后血清，并对抗体的滴度进行评价。MAPs在白兔体内诱导出了效价比为1:1000的抗Kv4.3特异性抗体。
关键词：Kv4.3；MAPs；western blotting；免疫沉淀
中图分类号：Q31
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2005)01-0006-05
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