改造的蜂毒素基因在毕赤酵母中分泌表达及培养条件研究
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赵亚华 董竟南 崔红 白云 华南农业大学生命科学学院 华南农业大学生命科学学院 华南农业大学生命科学学院 华南农业大学生命科学学院
【摘要】对蜂毒素基因进行改造后,通过PCR方法获得新蜂毒素基因(MEA),将其克隆到表达载体pPICZa-A,而后将重组表达载体pPICZa-A-MEA转化GS115,筛选获得重组酵母菌.对GS115-ME经甲醇诱导表达并对培养条件进行优化探讨.对改造的蜂毒素进行了溶血活性、热稳定性及酸碱稳定性测定.结果表明,蜂毒素基因成功地在毕赤酵母中表达,经改造的蜂毒素在保留了抗菌活性的同时溶血活性降低20倍左右,同时还具有良好的热稳定性和酸碱稳定性.
【关键词】 蜂毒素基因 毕赤酵母 分子改造 条件优化 溶血活性
【基金】广东省自然科学基金资助项目(980174)
【分类号】Q786
蜂毒素(M elittin)是欧洲蜜蜂(Apis m ellifera)蜂毒中的主要成分之一,约占蜜蜂毒液干重的40%～50%,相对分子质量2840D,序列为G I-G A V LK V LT TG LP A LISW IK R K R Q Q.蜂毒素是强碱性无细胞选择性的细胞溶解肽,且具有较强的水溶性以及两亲性犤1,2犦.蜂毒素在生物体内具
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摘 要：对蜂毒素基因进行改造后，通过PCR方法获得新蜂毒素基因(MEA)，将其克隆到表达载体pPICZa—A，而后将重组表达载体pPICZa—A—MEA转化GSll5，筛选获得重组酵母菌.对GSll5—M正经甲醇诱导表达并对培养条件进行优化探讨.对改造的蜂毒素进行了溶血活性、热稳定性及酸碱稳定性测定.结果表明，蜂毒素基因成功地在毕赤酵母中表达，经改造的蜂毒素在保留了抗菌活性的同时溶血活性降低20倍左右，同时还具有良好的热稳定性和酸碱稳定性.
关键词：蜂毒素基因：毕赤酵母；分子改造；条件优化；溶血活性
中图分类号：Q786
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2005)02—0124—05
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