兔骨组织总蛋白的提取和在免疫印迹法中的应用
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王簕 裴国献 南方医科大学南方医院创伤骨科;
【摘要】探讨快速有效的骨组织总蛋白提取法和利用该方法进行免疫印迹研究.采用单纯研磨法、单纯锤击法和锤击研磨法分别对兔骨组织蛋白进行提取,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白进行分离,利用免疫印迹法检测骨组织中beta-actin的表达,比较3种骨组织蛋白提取法.发现3种蛋白提取法均可满足免疫印迹研究要求,但是锤击研磨法提取的蛋白含量比单纯锤击法高,并能更好的保留49kDa以下的蛋白,而且该操作法比传统的单纯研磨法更为方便、快捷,还能节省液氮用量.锤击研磨法可作为提取骨组织蛋白的一种理想方法.
【关键词】 骨组织 蛋白提取 免疫印迹 肌动蛋白
【基金】国家自然科学基金委员会-广东省联合基金(u0732003)
【分类号】R68
目前许多问题如骨折的愈合、骨肿瘤发生机制、组织工程骨修复骨缺损的机制等[1~4]都急需解决,过去对体内骨组织的病理生理学研究主要采用免疫组化的方法.随着研究的不断深入,对相关问题的解释应逐步深入到蛋白水平和基因水平,这就要求对骨组织中蛋白的表达情况进行检测,这样
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摘要：探讨快速有效的骨组织总蛋白提取法和利用该方法进行免疫印迹研究.采用单纯研磨法、单纯锤击法和锤击研磨法分别对兔骨组织蛋白进行提取，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白进行分离，利用免疫印迹法检测骨组织中beta-actin的表达。比较3种骨组织蛋白提取法.发现3种蛋白提取法均可满足免疫印迹研究要求。但是锤击研磨法提取的蛋白含量比单纯锤击法高，并能更好的保留49 kDa以下的蛋白，而且该操作法比传统的单纯研磨法更为方便、快捷。还能节省液氮用量.锤击研磨法可作为提取骨组织蛋白的一种理想方法。
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