RecA蛋白介导的小粒野生稻STK类抗性基因富集文库的构建
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2010年6月1日
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韩小霞 崔玲玲 唐丽 陶小平 邢俊杰 李丁 谢灵灵 贺荣华 左佳 曹孟良 中南大学研究生院隆平分院;湖南隆平高科基因科技有限公司;国家杂交水稻工程技术研究中心;
【摘要】利用RecA蛋白的同源重组特性,以生物素标记的STK类抗性基因PCR扩增产物为探针,对小粒野生稻DNA文库进行富集,构建了库容量为1 710个的STK类抗性基因富集文库,通过菌落原位杂交筛选获得21个阳性克隆.其中10个阳性克隆进行了两端测序,生物信息学分析表明:有3个阳性克隆可分别定位于粳稻抗性基因附近和抗性基因内,可能是新的候选抗性基因;有2个阳性克隆可以在粳稻上定位,但周围无抗性基因片段;其它5个阳性克隆由于与栽培稻有多处匹配,不能精确定位。
【关键词】 RecA蛋白 小粒野生稻 菌落原位杂交 抗性基因 富集文库
【基金】国家973项目(2007CB109007) 国家863重点项目(2006AA100101) 国家科技支撑计划项目(2007BAD77B00) 国家转基因重大专项项目(2008ZX08001,2009ZX08001-010B)
【分类号】S511.9
小粒野生稻STK类抗性基因富集文库的构建小粒野生稻(OR.Minuta)(4n=48,BBCC)原产于亚洲,主要分布于马来西亚、菲律宾和印度尼西亚.由于长期处于野生状态,经受了各种逆境的选择,具备对多种病虫害的抗性.目前小粒野生稻对褐飞虱、白飞虱、黑尾叶蝉、稻蓟马、稻瘟病、二化螟、白
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