温和过甲酸氧化辅助酶解结合液质联用技术鉴定大鼠大脑皮层质膜蛋白质
http://www.100md.com
2011年3月1日
 |
| 第1页 |
参见附件。
曹锐 宋琴 陈平 梁宋平 王贤纯 湖南师范大学生命科学学院;
【摘要】由于膜蛋白质尤其是内在膜蛋白的强疏水性,分析和鉴定质膜蛋白质仍然是以质谱为基础的蛋白质组学的方法中的一个难点.过甲酸氧化是一种应用广泛的打开二硫键的方法,温和的过甲酸试剂能完全的将半胱氨酸转化为半胱磺酸,将甲硫氨酸转化为甲硫氨酸砜,从而使目的蛋白更易溶于水介质.采用蔗糖密度梯度离心法纯化得到大鼠大脑皮层质膜,提取的质膜蛋白质经温和过甲酸氧化处理后经胰酶酶解消化得到肽段,利用LC-MS/MS对所得肽段进行质谱分析,采集的原始数据用Mascot软件进行库搜寻鉴定.此方法是研究质膜蛋白质的新方法,温和过甲酸氧化显示出很好的氧化效果却避免其它不利于鉴定的副反应.从大鼠大脑皮层膜提取物共鉴定出220种蛋白质,其中73种为整合膜蛋白,证明对质膜蛋白质直接进行温和过甲酸氧化然后酶解的方法辅助酶解可以有效的鉴定质膜蛋白质.
【关键词】 温和过甲酸氧化 串联质谱 膜蛋白 蛋白质组学
【基金】国家自然科学基金资助项目(31000375) 湖南师范大学青年教师基金资助项目(070648)
【分类号】Q42
生物膜是细胞结构的基本形式,据报道细胞中大约有20%～25%的蛋白质是膜蛋白[1].细胞质膜蛋白质(plasma membrane protein,PM)具有多种功能,生物体内的许多重要生理过程如细胞内与细胞外的物质与能量交换,神经传导与代谢调控等都与生物膜有关.许多细胞质膜蛋白质也是第3期曹锐
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(3340kb)。