ESPRG3多克隆抗体制备及初步功能研究
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2012年4月1日
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张前军 卢光琇 中南大学生殖与干细胞工程研究所;人类干细胞国家工程中心;
【摘要】ESPRG3基因是一个与干细胞功能相关的基因,mESPRG3和hESPRG3基因被构建到原核及真核表达载体进行表达,原核表达蛋白用于制备多克隆抗体开展ESPRG3基因功能研究.真核表达载体EGFP被用于亚细胞定位.构建的mESPRG3基因原核及hESPRG3真核表达载体,成功进行了表达.利用IPTG诱导表达ESPRG3蛋白制备了多克隆抗体,免疫印迹和免疫组化结果表明制备的抗体具有特异性;表达的蛋白检测到体外具有结合DNA的能力.染色质免疫沉淀联合芯片技术检测到ESPRG3可以特异性结合到染色体上,且这些结合位点与Alu、及绝缘子序列具有关联性,可能通过这些位点调控胚胎干细胞的功能.
【关键词】 ESPRG 胚胎干细胞 多克隆抗体 染色质免疫沉淀(ChIP)
【基金】湖南省科技计划项目(2010FJ3026)
【分类号】R392.1
人类胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)是来自人囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM)的一种细胞[1],它具有完全的自我复制和自我更新的能力,在体外适当培养条件下它们能长期保持不分化状态并不断增殖;而且它们还具有多向分化的潜能,可以分化能力使它成为了组织再生,
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